油松花粉多糖的提取、纯化及抗氧化性研究

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进入21世纪后,花粉广泛应用于食品、药品和化妆品等领域。我国花粉事业仍然有些落后,要使我国花粉产业有所提高达到世界先进水平需靠科技创新,科研、生产、经营的协同努力。本论文以油松花粉为原料,对其中的花粉活性多糖的提取工艺进行研究,采用Sephadex G-100葡聚糖凝胶柱层析对油松花粉多糖进行初步纯化;运用紫外扫描分析、红外光谱分析、气相色谱分析等方法对花粉多糖的结构进行了初步研究。并在系统研究了油松花粉多糖理化性质以及初级结构的基础上,通过体外模拟实验和碘量法研究油松花粉多糖对活性氧自由基的清除效果及对油脂氧化的影响。本文主要研究内容与结果如下:1.采用温差—机械法对油松花粉粉碎破壁,研究了油松花粉多糖的水提工艺,探讨提取温度、提取时间、料液比对多糖提取得率的影响。在单因素试验的基础上,通过正交试验确定最佳提取工艺条件。结果表明:提取时间3h,温度90℃,料液比1:25时为最佳提取工艺参数,油松花粉多糖的得率为1.4%。油松花粉多糖Molish试验、蒽酮-硫酸法试验、与间苯二酚反应结果均呈阳性,淀粉的碘试验呈阴性。2.Sephadex G-100柱层析对油松花粉精制多糖进行初步分离纯化,蒸馏水洗脱得到单一组分多糖。气相色谱分析结果表明纯化的油松花粉多糖为杂多糖,至少由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖及半乳糖六种单糖组成,各单糖组成摩尔比为:Rha:Ara:Xyl:Man:Glu:Gal=1:0.2:0.14:0.15:0.63:0.86。另外,GC图谱显示油松花粉多糖还含有一个未知的单糖,峰面积非常小,含量比较低。UV检测显示油松花粉多糖在260hm与280hm处未见有核酸和蛋白特征吸收峰,经IR检测证实油松花粉多糖具有多糖类物质的特征吸收峰。3.通过体外模拟实验,研究油松花粉多糖对活性氧自由基的清除效果。结果表明:精制油松花粉多糖清除DPPH自由基有一定的量效关系,但是这种量效效应表现的不明显;对羟基自由基的清除试验表现出较好的活性,呈现明显的量效关系,EC50(清除50%自由基所需的样品浓度)=0.75mg/ml;对超氧阴离子自由基清除作用不显著,低浓度的油松花粉多糖几乎没有清除作用。对油脂具有较强抗氧化性,可以抑制猪油氧化。
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