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由于抗生素类产品在养殖业的广泛使用和滥用引起的耐药菌、药物残留等的不良后果,使人们不得不寻找新的方法和产品替代抗生素的使用。乳酸菌作为目前研究最多和应用最广的益生菌,在养殖业中成为理想的抗生素替代品促进畜牧业更好、更快的发展。本研究拟从健康边鸡肠道中分离鉴定并筛选出生长性能良好、耐受性强和抑制致病菌生长能力较强的优势乳酸菌,并对其进行相关安全性试验,最后与抗生素共同用于蛋鸡养殖中,研究并对比二者对蛋鸡体重、免疫功能、抗氧化能力和抗体水平的影响,为乳酸菌作为抗生素替代物在家禽生产中的应用提供理论依据,为将其开发为益生菌饲料添加剂提供参考。试验一边鸡源乳酸菌的分离鉴定及筛选:从健康边鸡肠道中分离鉴定并筛选出生长特性良好、耐受性强和抑制致病菌性能优良的乳酸菌。以健康边鸡十二指肠、空肠、回肠和盲肠中的内容物为样品,利用MRS选择培养基分离乳酸菌并统计各肠道乳酸菌数量,对分离到的菌株纯化后通过细菌形态学鉴定、菌株生化鉴定和16S rDNA序列分析进行鉴定,各肠道乳酸菌数量统计表明,乳酸菌在鸡肠道中主要分布于盲肠,空肠与回肠较少,十二指肠最少;通过形态学鉴定、菌株生化鉴定和16S rDNA序列分析成功分离鉴定到5株乳酸菌分别为菌株I(卷曲乳杆菌)、L(约氏乳杆菌)、G(唾液乳杆菌)、Y(植物乳杆菌)和F(嗜酸乳杆菌)。通过生长曲线的测定、耐酸试验、耐胆盐试验、胃液耐受性试验、肠液耐受性试验以及抑菌试验(致病性的大肠杆菌、沙门菌和金黄色葡萄球菌)进行优势乳酸菌株的筛选。生长曲线表明,G、Y和F菌株比I和L菌株更早进入对数生长期,生长速度较快;耐酸试验表明,G、Y和F菌株较I和L菌株受较低p H的影响较小;耐胆盐试验表明,G、Y和F菌株较I和L菌株受高浓度胆盐影响较小;胃液耐受性试验表明,G、Y和F菌株耐受人工胃液能力较强;肠液耐受性试验表明,G、Y和F菌株耐受人工肠液能力较强;抑菌试验表明,G、Y和F菌株的抑菌圈直径大于I和L菌株。经过上述步骤筛选后得到3株优势乳酸菌G、Y和F。试验二3株优势乳酸菌的安全性评价:对筛选出的3株优势菌株进行相关的安全性试验,确保其安全性以便在实际生产中投入使用。本研究安全性试验主要包括溶血试验、抗生素敏感性试验、菌株间拮抗试验和小鼠试验。溶血试验结果表明,3株分离菌株均不会引起溶血,对红细胞没有影响;抗生素敏感性试验结果表明,3株分离菌株对大部分抗生素敏感;菌株间拮抗试验结果表明,3株分离菌株互相均无拮抗现象,共同生长效果良好。3株优势菌株的混合菌液小鼠灌胃试验结果表明,小鼠行为表现正常,体重均有所增加,试验组与对照组组间无显著差异(P>0.05);试验组和对照组的血常规指标均处于正常范围,无显著性差异(P>0.05);试验组和对照组的丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、血尿素氮和肌酐的生化检查结果均在正常范围内,且无显著性差异(P>0.05);细菌易位检测表明,无细菌易位现象发生;对灌胃后小鼠肝脏和肾脏进行组织切片检查,对照组和实验组的肝脏和肾脏未见异常。本试验结果表明,G、Y和F 3株优势乳酸菌及其组成的混合菌液是安全的,可以在实际的生产中投入使用。试验三边鸡源混合乳酸菌替代抗生素饲喂蛋鸡的初步研究:将3株优势菌株混合后制成混合菌液,添加到蛋鸡日粮中饲喂,并与添加抗生素组比较,研究乳酸菌对蛋鸡体重、免疫功能、抗氧化能力和抗体水平的影响。试验采用单因素完全随机设计,分为对照组、抗生素组、高剂量组、中剂量组和低剂量组。结果表明,试验组的体重均显著高于对照组(P<0.05),中剂量组和抗生素组无显著性差异(P>0.05);试验组的血清免疫球蛋白Ig A、Ig G和Ig M含量均显著高于对照组(P<0.05),中剂量组和抗生素组的Ig A、Ig G和Ig M含量不存在显著性差异(P>0.05);试验组的脾脏指数、胸腺指数和法氏囊指数均显著高于对照组(P<0.05),中剂量组和抗生素组的脾脏指数、胸腺指数和法氏囊指数不存在显著性差异(P>0.05);对照组的丙二醛(MDA)显著高于抗生素组、中剂量组和高剂量组(P<0.05),抗生素组、中剂量组和高剂量组的超氧化物歧化酶(SOD)均显著高于低剂量组和对照组(P<0.05),试验组的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和总抗氧化能力(T-AOC)均显著高于对照组(P<0.05);试验组和对照组的抗体水平(新城疫抗体效价)均有不同程度的上升,且试验组均显著高于对照组(P<0.05),中剂量组和抗生素组无显著差异(P>0.05)。本研究表明混合乳酸菌对蛋鸡的体重、免疫功能、抗氧化能力和抗体水平具有促进作用,与抗生素具有相似的效果,且乳酸菌混合菌液的最佳添加剂量为10~9CFU/m L(中剂量组)。