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细胞核基质以及核基质蛋白在细胞生命活动中起着重要的作用,本研究以肿瘤细胞核基质为研究对象,通过高分辨率双向凝胶电泳分离分析及MALDI-TOF-MS肽指纹(PMF)鉴定技术结合蛋白质数据库查询的方法,对环六亚甲基双乙酰胺(hexamethylenebisacetamide,HMBA)诱导分化处理前后人肝癌SMMC-7721细胞核基质抽提物进行差异蛋白质组分析。鉴定与肝癌细胞相关的特异核基质蛋白,并初步探索它们的表达变化在肿瘤细胞诱导分化中的调节作用,为进一步深入研究肿瘤细胞恶性增殖与逆转之间的机理提供理论依据。
经5mMHMBA处理后,人肝癌SMMC-7721细胞出现了明显的诱导分化效应;细胞增殖受到抑制,细胞周期在G1/S期的阻滞显著,且细胞超微结构形态的恶性表型出现恢复性变化。选择性抽提结合整装电镜样品制备技术显示细胞核基质-中间纤维构型由肿瘤细胞核基质常见的粗细长短不规则积聚的纤维结构转变为层次分明、精细发达的交织网状结构。经HMBA处理后人肝癌细胞差异表达的核基质蛋白质可分别在转录水平、转录后加工水平以及翻译水平对基因表达起重要的调控作用,包括一些转录因子或辅因子:抑制Myc的转录活性的SIN3B蛋白,类TFIIH基础转录因子复合物p44亚基,与肿瘤发生相关的myc、p53、pRB以及NF-KB、HDMs、ARF等多种转录因子相互作用的nucleophosmin;mRNA选择性剪接因子SFRS1蛋白;以及在核糖体生物合成以及翻译相关的p27BBP/eIF6、LBP。其中SFRS1是新出现的蛋白质。
这些研究结果表明,HMBA通过干预肝癌细胞在转录水平以及转录后加工水平上的调控,下调诱发肿瘤恶性增殖的转录因子和核糖体的生物合成,抑制肿瘤功能相关的特异性蛋白质合成,来达到抑制肿瘤细胞生长的目的。并通过参与调节多种癌基因、抑癌基因的表达及其产物的活性,与信号转导通路中多个环节的成员之间相互作用从而逆转肝癌细胞的恶性增殖。证明了细胞增殖分化相关的特异核基质蛋白在肿瘤诱导分化及增殖调控中起重要作用,为进一步探索这些蛋白的功能以及在肿瘤细胞发生发展及逆转之间的分子机制提供了科学依据。