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背景 肺癌（LC）的死亡率在所有的恶性肿瘤中居首位。究其原因主要是LC早期诊断进展依旧缓慢，患者的五年生存率没有得到明显提高。与LC相关的自身抗体是近几年研究的热点。有学者研究发现，在 LC 患者出现临床症状的前五年，其血清中就已经存在与LC相关的自身抗体。 目的 本课题组前期通过高通量蛋白芯片的筛选与点制小芯片进行扩大样本规模的验证，发现8种IgG型自身抗体标志物对早期LC具有较好的诊断价值，其中3种自身抗体抗p53、ETHE1、HRAS抗体的组合对早期LC的诊断敏感性可达到50%，特异性（vs 肺部良性病变对照组+健康对照组）>90%。经ELISA法行小样本预实验，结果显示4种自身抗体标志物中抗TP53、HRAS、CTAG1A、NSG1抗体的组合检测对LC早期亦具有较好的诊断敏感性（56.50%）与特异性（91.00%）。在此研究基础上，本课题组拟通过构建ELISA法在大样本范围内深入研究4种自身抗体单独检测与组合检测对不同病理类型LC早期诊断的效能；分析5种常规抗原类肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1、SCCAg、NSE、PROGRP单独检测与组合检测对不同病理类型LC早期诊断的效能；比较4种自身抗体组合检测与5种抗原类肿瘤标志物组合检测在不同病理类型LC早期诊断效能上的差异；在保证特异性的前提下，分析并建立4种自身抗体组合检测与抗原类肿瘤标志物的组合检测模式，以进一步提高对不同病理类型LC早期诊断的效能。 方法 1. 采用Western Blot法验证抗TP53、HRAS、CTAG1A、NSG1抗体的ELISA检测结果 2. 构建ELISA法在大样本范围内深入研究抗TP53、HRAS、CTAG1A、NSG1抗体单独检测与组合检测对三种病理类型LC早期诊断的效能 采用由美国约翰·霍普金斯大学医学院高通量生物学中心提供的TP53蛋白、HRAS蛋白、CTAG1A蛋白和NSG1蛋白，构建间接ELISA法在大样本范围[LC早期、晚期患者分别为174、226例，肺部良性病变（LBL）患者118例，健康对照者（HC）173例]内进行4种自身抗体标志物的检测；深入研究4种标志物单独检测与组合检测对不同病理类型LC[小细胞肺癌（SCLC）、肺鳞癌（SCC）、肺腺癌（AD）]早期患者的敏感性与特异性，并绘制 ROC 曲线，进行早期诊断效能的比较。 3. 采用化学发光法检测相同研究对象血清5种LC相关抗原类肿瘤标志物CEA、CYFRA21-1、SCCAg、NSE、PROGRP的水平；深入研究5种标志物单独检测与联合检测对不同病理类型LC早期患者的敏感性与特异性，并绘制ROC曲线，进行早期诊断效能的比较。 4. 比较4种自身抗体组合检测与5种抗原类肿瘤标志物组合检测对不同病理类型LC早期患者敏感性、特异性、ROC曲线下面积（AUC）的差异；在保证特异性的前提下，分析并建立4种自身抗体组合与部分抗原类肿瘤标志物的联合检测模式，以进一步提高对不同病理类型LC早期诊断的敏感性。 结果 1. 4种自身抗体标志物抗TP53、HRAS、CTAG1A、NSG1抗体的Western Blot检测结果与ELISA的检测结果相一致。 2. 4 种自身抗体标志物单独检测与组合检测对三种病理类型 LC 早期诊断的效能 4种自身抗体在LBL组与HC组的最高阳性率仅为7.63%、2.89%。4种自身抗体中抗TP53、抗CTAG1A、抗NSG1抗体对SCLC早期患者的AUC>0.600，其中以抗TP53抗体的AUC最高达0.703，敏感性44.74%。4种自身抗体对SCC早期患者的AUC均>0.600，其中以抗CTAG1A抗体的AUC最高达0.676，敏感性 40.00%。4 种自身抗体中仅抗 TP53、抗 HRAS 抗体对 AD 早期患者的AUC>0.600，其中以抗TP53抗体的AUC最高达0.625，敏感性29.07%。 组合检测4种自身抗体对SCLC、SCC、AD早期患者的AUC分别为0.863、0.822、0.674。 3. 5 种抗原类肿瘤标志物单独检测与组合检测对三种病理类型 LC 早期诊断的效能 PROGRP、NSE、CEA、CYFRA21-1对SCLC早期患者的AUC>0.600，其中PROGRP的AUC最高达 0.871，敏感性76.32%，特异性（相对于LBL组）97.46%；NSE的AUC次之达0.778，敏感性63.16%，特异性（相对于LBL组） 85.89%。CYFRA21-1、SCCAg对SCC早期患者的AUC>0.700，其中CYFRA21-1的AUC最高达0.766。5种肿瘤标志物对AD早期患者的AUC均<0.600，其中最具诊断效能的CYFRA21-1（AUC 0.570）、CEA（AUC 0.564）在AD早期患者组的阳性率分别为26.74%、19.77%，且与LBL组相比较无显著性差异（P>0.05）。 组合检测5种抗原类肿瘤标志物对SCLC早期、SCC早期、AD早期患者的AUC分别为0.846 、0.769、0.627。 4. 4种血清自身抗体组合检测与5种抗原类肿瘤标志物组合检测诊断效能的比较 两种组合检测模式对三种病理类型LC早期患者的AUC均无显著性差异（P>0.05）。4种自身抗体组合检测对SCLC早期、SCC早期、AD早期患者的诊断敏感性分别为84.21%、76.00%、45.34%，与5种抗原类肿瘤标志物组合检测相比较无显著性差异（P>0.05）； LBL组4种自身抗体组合检测的阳性率为16.11%，明显低于5种抗原类肿瘤标志物组合检测的51.69%（P<0.01）。 5. 4种血清自身抗体组合联合抗原类肿瘤标志物对LC早期诊断的效能 4种自身抗体组合+PROGRP的联合检测对SCLC早期患者的 AUC最高达0.908。4 种自身抗体组合+SCCAg 的联合检测对 SCC 早期患者的 AUC 最高达0.818。4种自身抗体组合+CEA、4种自身抗体组合+CYFRA21-1+CEA的联合检测对AD早期患者的AUC分别为0.696、0.700，敏感性分别为56.98%、66.28%，特异性分别为82.13%、73.54%。 结论 1. 4种自身抗体标志物对SCLC、SCC具有较好的早期诊断效能，其中以抗TP53抗体对SCLC的早期诊断效能最高，抗CTAG1A抗体对SCC的早期诊断效能最高；但对AD的早期诊断敏感性不足。4种自身抗体的组合检测有助于提高针对早期 LC 的诊断效能，这在 SCLC 早期、SCC 早期患者中表现得尤为突出（AUC>0.8），但对早期AD的AUC不到0.7，诊断效能欠理想。 2. 5种抗原类肿瘤标志物中，PROGRP、NSE对SCLC具有理想的早期诊断效能，其中以PROGRP的早期诊断效能最高；CYFRA21-1、SCCAg对SCC早期有较好的诊断效能，其中以 CYFRA21-1 的早期诊断效能最高；对于 AD，5 种肿瘤标志物的早期诊断效能均欠理想。联合检测5种肿瘤标志物并不能明显提高对三种病理类型LC早期患者的诊断效能。 3. 4种自身抗体组合与肿瘤标志物组合在LC的早期诊断方面有着相近的诊断敏感性，但是自身抗体组合具有特异性高的优势；建立4种自身抗体组合与部分常规肿瘤标志物的联合检测模式，有助于进一步提高针对SCLC、AD早期患者的诊断效能，但对SCC的早期诊断效能无明显改善。