【摘 要】
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妊娠是决定母猪繁殖性能的重要生物学过程,对其机制研究是母猪遗传性能改良的基础。母猪子宫内膜聚集大量免疫细胞,表达丰富的免疫调控分子。妊娠期间,子宫的免疫耐受水平对母猪产仔数有重要影响。本研究旨在利用小鼠模型,解释妊娠期间子宫免疫耐受现象,并以繁殖性能具有显著差异的三个猪种(杜长大猪、约克夏猪、藏猪)为研究对象,采用q RT-PCR测定发情期子宫不同部位的免疫相关基因表达水平,试验结果如下:(1)通
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妊娠是决定母猪繁殖性能的重要生物学过程,对其机制研究是母猪遗传性能改良的基础。母猪子宫内膜聚集大量免疫细胞,表达丰富的免疫调控分子。妊娠期间,子宫的免疫耐受水平对母猪产仔数有重要影响。本研究旨在利用小鼠模型,解释妊娠期间子宫免疫耐受现象,并以繁殖性能具有显著差异的三个猪种(杜长大猪、约克夏猪、藏猪)为研究对象,采用q RT-PCR测定发情期子宫不同部位的免疫相关基因表达水平,试验结果如下:(1)通过单侧输卵管结扎创建单侧妊娠小鼠模型。妊娠7 d,将肿瘤移植到小鼠子宫。妊娠17 d后,通过HE和免疫组化染色观察双侧子宫成瘤情况,结果表明妊娠侧成瘤率极显著高于未妊娠侧(妊娠侧:72.2%,未妊娠侧:8.3%;P<0.001)。(2)选择双侧均成瘤的子宫,通过免疫组化检测免疫细胞CD3+和CD8+表达差异。结果显示未妊娠侧包裹肿瘤的CD3+和CD8+细胞数量均显著高于妊娠侧(妊娠侧:7%CD3+,4%CD8+;未妊娠侧:41%CD3+,22%CD8+;P<0.05),且CD8+与CD3+的细胞比率妊娠侧均显著高于未妊娠侧(妊娠侧:71%,未妊娠侧:52%;P<0.05)。从细胞水平上确定了妊娠免疫耐受形成的局部性及CD8+细胞对妊娠免疫耐受的调节性。(3)通过比较同种母猪子宫不同部位免疫相关基因的表达差异,发现在子宫角中炎症相关基因(IL-6和TNF-α)、调控因子相关基因(ICAMI、IRF1和CXCR4)的表达显著上调(P<0.05),炎症相关基因IL-1β表达显著下调(P<0.001)。表明子宫角的免疫调节能力可能更稳定。(4)通过比较不同猪种子宫免疫基因表达差异,发现相较于藏猪,在杜长大猪、约克夏猪中显著上调的基因有IL-6、ICAMI、IRF1、CXCR4和IGF2(P<0.05),主要作用是增加胚胎的附植能力;显著低表达的基因有TNF-α、L-selectin、STAT1、CD163与CD68(P<0.05),主要作用降低母体对胎儿的排斥。综上所述:妊娠子宫免疫耐受环境的形成具有局部性,CD8+细胞在妊娠免疫耐受机制中存在调节性作用。母猪发情期子宫不同部位的免疫相关基因表达存在差异,不同品种母猪发情期子宫的免疫相关基因表达存在差异。
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