1-甲基色氨酸与5-氟尿嘧啶联合干预荷胃癌小鼠对髓源性抑制细胞的影响

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目的:研究1-MT在荷胃癌小鼠中对MDSC的影响以及其与5-FU联合应用后对MDSC数量变化的影响。方法:(1)应用pcDNA3.1-IDO质粒及相应空质粒用脂质体转染法建立稳定表达IDO的MFC细胞系,转染成功后继续构建荷胃癌小鼠皮下移植瘤模型,并随机分为MFC组,空质粒组,IDO转染+生理盐水组、5-FU组、1-MT组和5-FU+1-MT联合处理组(各组小鼠均为8只),观察各组小鼠生长情况及移植瘤大小,药物干预的影响,并用病理HE染色及IDO染色观察结果。(2)采用流式细胞术检测各组小鼠脾脏中MDSC的数量变化。(3)采用免疫荧光法检测小鼠肿瘤组织MDSC的表达。(4)采用免疫组化法检测小鼠肿瘤组织IDO的表达。结果:(1)将相应细胞种植于615小鼠颈背部后7天出现绿豆肿瘤,其中转染组与空质粒、未转染组的肿瘤相比体积明显较大,生长快;药物处理组较转染组肿瘤体积明显变小,以1-MT和5-FU联合处理组变化最显著,差异有统计学意义;但是单用药物处理组间无显著性差异。(2) HE染色结果示:各药物处理组均可见到胃癌细胞,但细胞数量较生理盐水处理组有明显减少,以联合处理组为著,同时坏死区域也有所减少。(3)免疫组化结果显示:小鼠肿瘤组织有明显IDO表达,但是联合处理组IDO表达减弱;免疫荧光法检测连续切片中小鼠肿瘤组织有MDSC聚集现象。(4)流式细胞术:小鼠脾脏中MDSC的表达量检测结果显示正常小鼠MDSC的数量很低,约为(1.2±0.3)%;空质粒组小鼠MDSC的数量明显升高,约为(38.6±0.6)%;而转染组小鼠的MDSC的数量明显高于未转染组,可达(49.8±1.1)%;用药后各组小鼠的MDSC数量均有所减少,但单用5-FU组和单用1-D-MT组MDSC的数量分别为(24.1±0.8)%、(26.2±1.0)%,差别不明显,联合用药组MDSC的数量约为(18.5±0.5)%,有统计学意义。结论:1-MT与5-FU联合应用MDSC的数量在脾脏及肿瘤组织均减少,在一定程度上可以改善肿瘤微环境。
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