药用菌液体培养和多糖活性研究

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以本实验室野外采集并纯化培养得到的赤芝(Ganoderma lucidum (leyss.:Fr.) Karst)、蝉花(Cordyceps sobolifera (Hill.) Berk. et Br)、硫磺菌(Laetiporus sulphureus (Fr.) Murrill)为实验材料,以菌丝产量为目标,探索3种药用菌的液体发酵培养基优良配方。通过对菌丝体和发酵液多糖的提取,研究不同种类药用菌多糖得率。采用Lewis肺癌实体瘤实验模型,研究不同种类多糖对肿瘤抑制率的高低;以及采用脾细胞增殖实验研究多糖对免疫细胞的增殖刺激作用,探索不同种类多糖的功效作用,为野生药用菌的开发利用提供参考数据。主要研究结果:1.在适宜的培养条件下,通过对3种药用菌培养基配方比较实验,筛选出适合各种药用菌生长、菌丝体产量高的液体培养基优良配方。①赤芝液体培养基配方:葡萄糖30g,豆粉20g,(NH4)2SO4 2g ,KH2PO41g ,MgSO4 0.8g ,VB60.02g,水1000mL。②蝉花液体培养基配方:马铃薯200g,豆粉5g,葡萄糖20g,KH2PO42g,水1000mL。③硫磺菌液体培养基配方:葡萄糖30g,玉米粉10g,酵母提取物5g,KH2PO4 1.0g,CaCO32.0g,MgSO40.5g,水1000mL。2.通过对3种药用菌菌丝体和发酵液的多糖提取研究,结果表明相同的提取方法,不同药用菌菌丝体、发酵液多糖提取率均有显著差异,其中赤芝菌丝体、发酵液多糖提取率均为最高,分别为18.5%和23.3%。3.测定3种药用菌多糖中多糖含量和蛋白质含量,3种菌丝体多糖多糖含量由高到低依次是赤芝菌丝体多糖>蝉花菌丝体多糖>硫磺菌菌丝体多糖,3种发酵液多糖具多糖含量由高到低依次是赤芝发酵液多糖>硫磺菌发酵液多糖>蝉花发酵液多糖。4.通过3种药用菌菌丝体粗多糖对Lewis肺癌的体内抑制作用的研究,表明3种真菌菌丝体多糖对肿瘤均有一定抑制效果。其中,对Lewis肺癌的最大抑制率是赤芝高剂量组为50.2%,其次是蝉花高剂量组为46.3%;硫磺菌多糖的最大抑瘤率仅为35.7%,低于其他2种多糖的最大抑瘤率。5.脾细胞增殖实验结果表明6个样品的增强免疫力作用依次为蝉花发酵液多糖>蝉花菌丝体多糖>赤芝发酵液多糖>硫磺菌发酵液多糖>赤芝菌丝体多糖>硫磺菌菌丝体多糖;药用菌发酵液多糖对细胞增殖作用的效果优于菌丝体多糖。
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