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肝素前体多糖是脊椎动物在催化合成肝素的过程中产生的前体物质,该物质经过一系列的硫酸化及异构化修饰后即可合成肝素。本研究以E.Coli K5发酵液为原料,对肝素前体多糖的提取除杂、分离纯化、检测以及结构鉴定进行了研究。研究结果如下：1.采用有机溶剂沉淀的方法,经过提取得到的肝素前体多糖粗品为淡黄色粉末物质,其糖醛酸含量为23.9%；对提取的粗多糖进行了除杂工艺研究,优化了双氧水氧化法脱色和Sevage法除蛋白的工艺条件。经综合考虑双氧水氧化法脱色的最佳条件为：双氧水浓度为1.5%,温度为25℃,时间为3h,多糖的脱色率为67.35%；Sevage法除蛋白的最佳工艺条件为氯仿：正丁醇(V/V)为4：1,样品：试剂(W/W)为1：1,萃取时间1Omin,萃取次数为3次,在此条件下多糖的除蛋白率为76.59%。2.研究了乙醇沉淀法对多糖纯化效果的影响。结果表明,当heparosan多糖浓度为14%(W/V)、Nacl浓度为3%(W/V)、乙醇浓度为70%(V/V),重复沉淀4次时,纯化物中的葡萄糖醛酸含量可达44.52%(W/W),多糖的得率为43.50%(W/W)。3.研究了壳聚糖沉淀法对多糖纯化效果的影响。当壳聚糖用量为4.0mg时,得到沉淀的多糖回收率为94%(W/W)。沉淀继续纯化得到多糖纯品,其糖醛酸含量为45.69%,得率为40.36%。4.研究了DEAE Sepharose fast flow离子交换法对多糖纯化效果的影响。经过该法纯化的多糖其糖醛酸含量为49.35%,得率为38.52%。5.对多糖的糖醛酸含量、纯度、分子量和理化性质进行了检测和鉴定。硫酸-咔唑法测糖醛酸含量的最优条件是：水解温度为25℃、硼砂-硫酸用量为4mL、水解时间为20min、咔唑-乙醇用量为0.15mL、显色时间为10min。通过重现性实验、稳定性实验以及回收率实验证明了这一方法的可靠和准确。采用高压凝胶渗透色谱法(HPGPC)对多糖的纯度和分子量进行了鉴定,结果表明离子交换法得到的多糖纯度最高(接近100%),其分子量为4.5x104Da；并对多糖的理化性质进行了分析,结果符合该多糖的相关特征。6.通过紫外、红外、核磁、单糖组成、二糖结构几个方面对肝素前体多糖的结构进行了鉴定,结果表明其分子结构为[→4)β-D-葡萄糖醛酸(1→4)α-D-N-乙酰-葡萄糖胺(1→]n。