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目的:本实验旨在探讨熊果酸对人胃癌细胞BGC-823的增殖抑制和诱导凋亡作用及其机制。方法:熊果酸实验用浓度为0、20、30、40、50、60 μmol/L,监测时间点分别为熊果酸作用12、24、36、48 h。采用MTT法检测熊果酸对BGC-823细胞的增殖抑制效应,并得到不同熊果酸实验浓度对BGC-823细胞的增殖抑制率和各个作用时间点的IC50;Hoechest33258荧光染色法观察DNA片段化,细胞凋亡征象;用流式细胞仪检测细胞周期的变化和细胞凋亡率;Western-blotting检测BGC-823细胞内细胞色素C(cytochrome c,cyt-c)、survivin、caspase-3的表达和活性。实验数据以均数±标准差((?)±s)表示,采用SPSS统计软件对数据进行,检验,以P<0.05为显著性检验水准。结果:MTT结果表明熊果酸在终浓度超过20 μmol/L并作用24 h后对BGC-823细胞开始具有增殖抑制效应(P<0.05),并呈浓度和时间依赖性。60 μmol/L熊果酸作用48 h后,增殖抑制率达到85.20%,BGC-823细胞增殖几乎停止。直线回归方程统计结果表明,熊果酸作用BGC-823细胞12,24,36,48 h时的IC50分别为58.83μmol/L、43.10 μmol/L、37.67 μmol/L和31.27 μmol/L。Hoechst33258荧光染色显示BGC-328细胞胞核体积变小、皱缩,其染色质呈浓染的块状或颗粒状,聚集于核周边或裂解成碎片,并出现凋亡小体。流式细胞术检测结果表明不同浓度熊果酸作用24 h后BGC-823细胞的G1期降低,并出现明显的S期阻滞:对照组、20、30、40、50、60 μmol/L药物组的S期细胞比例分别为32.2%、25.0%、40.1%、45.4%、47.9%、77.9%;同时在流式细胞仪DNA组方图上出现典型的凋亡细胞峰(亚G1峰),药物组的凋亡率分别为6.0%、13.9%、33.6%、46.5%和68.6%,而对照组的凋亡率仅为0.9%(P<0.05)。Western印迹法检测20～60 μmol/L UA作用BGC-823细胞24 h后,与对照组相比,15 kD处细胞色素C的表达逐渐增加;约16.5 kD处survivin的表达依次降低;32 kD处caspase-3酶原的表达减少,而17 kD和19 kD处caspase-3活性片段的表达增加,并均呈浓度依赖性。结论:熊果酸能够在体外抑制人胃癌细胞BGC-823增殖并诱导其凋亡。促进cyt-c释放增加,下调survivin表达,继而引起caspase-3的活化可能是其作用机制之一。