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目的：观察肺纤方治疗博莱霉素诱发大鼠肺纤维化的疗效,探讨肺纤维化的发病机制和肺纤方治疗肺纤维化的作用机理。方法：Wistar雄性大鼠80只,体重200±20g,随机数字表法分为空白组、模型组、激素组、中药组,每组20只。大鼠置于屏障级动物室适应性喂养1周。模型组、激素组、中药组气管插管后一次性推注博莱霉素1mg/kg剂量,空白组气管内一次性推注等体积的生理盐水。造模后第2天开始灌胃给药。中药组肺纤方给药剂量为1.25g／(kg·d),激素组强的松给药剂量为3mg/(kg·d).模型组和空白组给予等体积0.5%羧甲基纤维素钠溶液。14d、28d分批处死动物。用3.5%水合氯醛1 m1／100g体重,腹腔注射麻醉大鼠后。以动脉血气针取腹主动脉血2ml,15min内送检。打开胸腔,行肺组织灌注。待大鼠头部、上肢、肺叶变硬时,停止灌注。取出肺脏,置于中性福尔马林中固定24h,常规脱水、石蜡包埋,连续组织切片(厚5μm),进行苏木精-伊红(HE)染色和三色(Masson)染色。HE染色切片分为无染区、深染区、浅染区。OLYMPUS显微数码下采集图像。以Image-Pro Plus 6.0进行图像分析,测出各部分所占面积,取其平均值(mm2)。计算出各组肺泡炎和肺纤维化分级。免疫组化SABC法检测大鼠肺组织切片血管内皮细胞CD34表达状况,用CD34抗体标记血管内皮细胞,镜下计数单位面积中的微血管数目,即微血管密度(MVD)。免疫组化SABC法检测大鼠bFGF、VEGF、FLT-1、FLK-1、ANG-2的表达情况,结合图像分析技术,比较各组大鼠微血管新生促进因子表达情况。结果：HE染色结果：空白组肺组织形态无明显病变。14d模型组肺泡隔明显增宽,肺泡隔和肺泡壁见较多炎细胞侵润。纤维结缔组织增生,出现实变区。14d激素组肺泡隔增宽,部分肺泡实变和大量炎性细胞浸润。14d中药组可见不同程度的炎症和纤维化灶,部分小支气管周围可见实变区。28d模型组、激素组、中药组炎症表现均较14d同组减轻。28d模型组肺泡隔明显增宽,胶原纤维显著增多,纤维组织呈斑片状分布,部分肺泡结构消失,萎缩闭塞,个别肺泡囊性扩张。肺泡隔和肺泡壁伴炎细胞侵润,较14d模型组减轻。28d激素组肺泡隔轻度纤维化。细小支气管周围可见纤维灶,部分肺泡和细支气管内可见炎性细胞。28d中药组肺泡隔纤维增生灶较少,肺泡内可见散在炎性细胞。Masson染色结果：空白组肺组织形态无明显病变。14d模型组肺泡隔增宽,各级支气管和血管周围可见蓝色胶原纤维增生。14d中药组肺泡隔,各级支气管周围见少量纤细的胶原纤维。28d模型组肺泡壁、肺泡隔、终末细支气管、呼吸性细支气管周围和小支气管管壁可见大量胶原纤维增生。28d中药组胶原纤维增生较轻。激素组胶原纤维增生程度介于模型组和中药组之间。HE染色形态定量分析结果：14d激素组深染区较模型组减少,差异有显著性意义(P<0.05)；14d中药组深染区较激素组明显减少,差异有非常显著性意义(P<0.01)。14d激素组浅染区与模型组比较,差异无显著性意义(P>0.05)；14d中药组浅染区较模型组明显减少,差异有非常显著性意义(P<0.01)。28d激素组深染区与模型组比较,差异无显著性意义(P>0.05)；28d中药组深染区较模型组明显减少,差异有非常显著性意义(P<0.01)。28d激素组浅染区与模型组比较,差异无显著性意义(P>0.05)；28d中药组浅染区较模型组明显减少,差异有非常显著性意义P<0.01)。MVD结果：14d模型组、激素组MVD均较空白组增高,差异均有显著性意义(P<0.01,P<0.05)。28d模型组、激素组、中药组MVD均较同组14d降低,差异均有显著性意义(P<0.01,P<0.05,P<0.05)。激素组MVD与模型组比较,差异均无显著性意义(P>0.05)。14d中药组MVD较模型组降低,差异有显著性意义(P<0.05),28d中药组MVD较模型组明显降低,差异有非常显著性意义(P<0.01)。微血管新生促进因子表达结果：模型组bFGF、ANG-2、FLK-1的表达均较空白组明显增强,差异均有非常显著性意义(P<0.01)；模型组VEGF表达均较空白组增强,差异均有显著性意义(P<0.05)；14d模型组FLT-1表达较空白组增强,差异有显著性意义(P<0.05),28d模型组FLT-1表达较空白组明显增强,差异有非常显著性意义(P<0.01)。中药组bFGF、ANG-2、FLK-1的表达均较模型组明显减弱,差异均有非常显著性意义(P<0.01)；中药组VEGF表达较模型组减弱,差异均有显著性意义(P<0.05)；14d中药组FLT-1表达较模型组减弱,差异有显著性意义(P<0.05),28d中药组FLT-1表达较模型组明显减弱,差异有非常显著性意义(P<0.01)。激素组bFGF、VEGF、FLT-1、FLK-1、ANG-2的表达与模型组比较,差异均无显著性意义(P>0.05)。血气分析结果：模型组、激素组、中药组在14d和28d均可出现低氧血症。激素组Pa02与模型组比较,差异均无显著性意义(P>0.05)。中药组Pa02较模型组均明显升高,差异均有非常显著性意义(P<0.01)。结论：1以博莱霉素1mg/kg剂量气管内推注成功复制了肺纤维化大鼠模型。2博莱霉素诱发大鼠肺纤维化病变呈早期肺泡炎,晚期肺纤维化的演变过程。3肺纤方具有改善肺纤维化大鼠肺泡炎症和肺纤维化的作用,疗效优于强的松。4肺纤方可改善肺纤维化大鼠的低氧血症,这可能是通过肺纤方改善大鼠肺朝百脉的功能来实现的。5博莱霉素诱发大鼠肺纤维化发病过程中存在病理性微血管新生,微血管新生以14d尤为活跃,随肺纤维化的加重病理性微血管新生逐渐减弱,肺组织微血管密度进行性减少。6博莱霉素诱发大鼠肺纤维化发病过程中微血管新生促进因子bFGF、VEGF、FLT-1、FLK-1、ANG-2的表达上调,肺组织微血管新生活跃。微血管新生可能是肺纤维化发病过程中一个重要环节,抑制微血管新生可能会从根本上延缓肺纤维化进展。7肺纤方治疗肺纤维化的机理可能是通过抑制微血管新生促进因子bFGF、VEGF、FLT-1、FLK-1、ANG-2的表达,进而抑制肺组织微血管新生,从而改善肺纤维化病情,延缓肺纤维化进展。8肺纤方可能是通过改善肺朝百脉的功能,改善肺纤维化低氧血症,从而使微血管新生促进因子表达下调的。