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中药复方的组(组分种类与数量)方(含拆方组合)配伍可对中药化学成分在体内的药动学过程产生明显的作用,并与疗效和毒副作用密切相关,值得研究。而方(含拆方组合)组成(组分种类与数量)、主要药物动力学特征量与药效动力学特征量等最重要的几个数据集之间存在大量非线性、高噪声、多因子的复杂关系,本论文依据“复杂系统的预测可以通过模型模拟进行研究”的原理。采用系统模拟的方法,按照黄连解毒汤原方比例,建立了小檗碱、黄芩苷、栀子苷、巴马汀四中主成分相互配伍的模拟组合,从而能够在一定范围内,作为全方的模拟模型,通过比较不同模拟体系的PK-PD的差异,分析主成分配伍组合的作用特点,以期能够阐明抗脑缺血作用物质的机制,更合理的指导临床用药。目的:比较研究分别以黄连解毒汤中四种效应成分:小檗碱、黄芩苷、栀子苷、巴马汀为主题,进行模拟配伍的各模拟组合组的药动学特征,并对各模拟组合组进行药动学整合,进行各组药物抗自由基氧化药效学研究,建立浓度-时间-效应曲线,初步以药效结果验证药代动力学结果。内容:1.比较研究以栀子苷为主题进行模拟组合的各组:栀子苷+小檗碱组,栀子苷+黄芩苷组,栀子苷+小檗碱+黄芩苷组,栀子苷+小檗碱+巴马汀组,桅子苷+黄芩苷+巴马汀组,栀子苷+小檗碱+黄芩苷+巴马汀组中栀子苷在脑缺血大鼠药代动力学特征,同时进行灌胃给药后,进行脑缺血和正常状态下大鼠的药代动力学特征比较;2.比较研究以黄芩苷为主题进行模拟组合的各组:黄芩苷+小檗碱组,黄芩苷+栀子苷组,黄芩苷+小檗碱+栀子苷组,黄芩苷+小檗碱+巴马汀组,黄芩苷+栀子苷+巴马汀组,黄芩苷+小檗碱+栀子苷+巴马汀组中黄芩苷在脑缺血大鼠药代动力学特征,同时进行灌胃给药后,进行脑缺血和正常状态下大鼠的药代动力学特征比较;3.比较研究以巴马汀为主题进行模拟组合的各组:巴马汀+小檗碱组,巴马汀+小檗碱+栀子苷组,巴马汀+小檗碱+黄芩苷组,巴马汀+小檗碱+黄芩苷+栀子苷组,巴马汀+黄芩苷+栀子苷组中巴马汀在脑缺血大鼠药代动力学特征,同时进行灌胃给药后,进行脑缺血和正常状态下大鼠的药代动力学特征比较;4.比较研究以小檗碱为主题进行模拟组合的各组:小檗碱+栀子苷组,小檗碱+黄芩苷组,小檗碱+黄芩苷+栀子苷组,小檗碱+巴马汀组,小檗碱+巴马汀+栀子苷组,小檗碱+黄芩苷+栀子苷+巴马汀组,小檗碱+黄芩苷+巴马汀组中小檗碱在脑缺血大鼠药代动力学特征,同时进行灌胃给药后,进行脑缺血和正常状态下大鼠的药代动力学特征比较;5.对各模拟组合组中的成分进行分类整合比较研究;6.采集各模拟组合组在脑缺血大鼠体内的抗自由基氧化药效学数据,结合药物在脑缺血大鼠体内的整合药动学,建立血药浓度-时间-效应曲线。方法:1.将小檗碱、黄芩苷、栀子苷、巴马汀提取物按原方比例相互配伍成各模拟组合组,线栓法制备大鼠脑缺血模型,给药后在规定的不同时间点取血。2.建立血浆中小檗碱、黄芩苷、栀子苷、巴马汀的含量HPLC检测方法;考察病理状态和正常状态下不同模拟组合相应成分的药代动力学的作用规律;3.采用曲线下面积自定义权重系数的方法对各模拟组合组进行综合整合,研究各成分在黄连解毒汤全方中的作用,以及各成分之间的相互影响;4.进行抗自由基氧化药效动力学研究,测定不同时间点血浆SOD、MDA值;结合黄连解毒汤各模拟组合组全部指标成分的整合药动学,建立PK-PD曲线;比较不同配伍组合的主成分的药代动力学特征并进行药效学研究。结果与结论:体内药代动力学研究结果:1)灌胃给药后,相对于正常组,脑缺血大鼠对于各主要成分的吸收均比较好,表现在达峰时间短,达峰浓度大等药动学参数上;2)对于以栀子苷为主题的各模拟组合组的模型组而言,将黄连解毒汤全方组与模拟组合组相比,栀子苷+巴马汀+小檗碱与全方的吸收效果相当,AUC(0-∞)分别为218.277±38.916 mg/L·h和208.272±72.411mg/L·h,其次是栀子苷+小檗碱和栀子苷+黄芩苷+巴马汀,AUC(0-∞)分别为130.812±48.276 mg/L·h和116.686±7.483 mg/L·h,再次是栀子苷+黄芩苷+巴马汀+小檗碱和栀子苷+黄芩苷+小檗碱和栀子苷+黄芩苷基本相同,AUC(0-∞)分别为92.18±12.078,78.739±7.503,72.009±8.601mg/L·h;对于以黄芩苷为主题的各模拟组合组的模型组而言,将黄连解毒汤全方组与模拟组合组相比,全方的吸收效果与黄芩苷+栀子苷组的吸收效果相当,AUC(0-∞)分别为66.732±10.169和63.798±11.642 mg/L·h,次之是黄芩苷+栀子苷+巴马汀+小檗碱和黄芩苷+栀子苷+巴马汀和黄芩苷+栀子苷+小檗碱和黄芩苷+小檗碱,AUC(0-∞)在20 mg/L·h到30 mg/L·h之间,吸收最差的是黄芩苷+巴马汀+小檗碱组;对于以巴马汀为主题的各模拟组合组的模型组而言,将黄连解毒汤全方组与模拟组合组相比,巴马汀+小檗碱组和巴马汀+小檗碱+黄芩苷组的吸收最好,AUC(0-∞)分别为46.47±9.542 mg/L·h 和 48.398±26.521 mg/L·h,平均驻留时间更长,MRT(0-∞)分别为 151.546±106.088h,151.546±106.088 h。全方组和其余各组吸收相当,均吸收相对较差;对以小檗碱为主题的各模拟组合组的模型组而言,将黄连解毒汤全方组与模拟组合组相比,全方的中小檗碱的吸收最好,AUC(0-∞)为161.92±44.503mg/L·h,次之是小檗碱+栀子苷+黄芩苷+巴马汀组和小檗碱+栀子苷组和小檗碱+栀子苷+巴马汀组,AUC(0-∞)分别为62.301±37.328 mg/L·h和49.635±7.149 mg/L·h和45.888±7.18 mg/L·h,吸收最差的是,小檗碱+黄芩苷和小檗碱+栀子苷+黄芩苷和小檗碱+巴马汀和小檗碱+黄芩苷+巴马汀AUC(0-∞)均将近20mg/L·h。3)将黄连解毒汤和各模拟组合组整合后发现,巴马汀+小檗碱+栀子苷组、小檗碱+栀子苷和黄连解毒汤全方的药代动力学参数最为接近,与黄连解毒汤全方组有可比性,AUC(0-∞)分别为 175.356±30.948,104.961±35.376,134.64±38.35 mg/L·h,MRT(0-∞)分别为42.528±11.715,27.749±15.01,51.19±17.02h;Tmax 分别为 0.5±0,0.75±0,0.542±0.102h;Cmax分别为10.118±0.627,9.15±0.527,8.05±1.43mg/L,吸收最差的是小檗碱+黄芩苷组,AUC(0-∞)为16.362±2.523mg/L·h,其余各模拟组合组的吸收大致相同均介于两者之间。抗自由基氧化药效动力学研究结果,脑缺血造成大鼠体内发生缺氧损伤,灌胃给药后,各组大鼠72h内SOD含量上升、MDA水平显著降低,表明黄连解毒汤各模拟组合均能够改善由于缺血损伤引起的缺氧抵抗,黄连解毒汤全方对SOD含量的回升以及MDA水平的降低的效果与巴马汀+小檗碱+栀子苷组最为接近;将黄连解毒汤各模拟组合进行药动学整合,结合药效动力学结果后,SOD和MDA曲线图显示出来的量效关系不大。