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目的：观察加减三甲散对免疫性肝纤维化大鼠肝脏病理性血管新生HIF-1 a/VEGFA/VEGFR-2及PDGFB/PDGFR/β信号通路的影响,探讨加减三甲散改善肝纤维化的效果是否与抑制肝脏病理性血管新生相关,以期部分揭示“主客交”理论的科学内涵。方法：选用SPF级Wistar雄性大鼠60只,设置正常对照组(简称正常组)20只、模型对照组20只、阳性对照组(简称鳖甲片组)10只和加减三甲散组(简称三甲散组)10只。除正常组外,其余3组均采用猪血清腹腔注射复制免疫性肝纤维化模型。猪血清注射12周后,随机处死正常组和模型对照组大鼠(此时记录为模型对照1组,简称模型1组)各6只,取肝脏组织,HE和MASSON染色后光镜观察肝脏病理形态,判断造模是否成功,并取其肝脏组织及血清标本。确定造模成功后,三甲散组给予加减三甲散组方药物灌胃,鳖甲片组给予复方鳖甲软肝片灌胃,正常组及模型对照组(此时记录为模型对照2组,简称模型2组)给予同体积的生理盐水灌胃,治疗60天结束,随机处死各组大鼠各6只,取肝脏组织,HE和MASSON染色光镜观察肝脏病理形态,电镜观察肝细胞超微结构,CD34标记检测肝脏微血管密度,Wester-Blot法检测肝组织HIF-1α、 VEGFA/VEGFR-2、PDGFB/PDGFR-β蛋白含量,RT-PCR法检测肝脏组织HIF-1α、VEGFA/VEGFR-2、PDGFB/PDGFR-βmRNA含量。心脏采血,全自动生化分析仪检测肝功能指标,ELISA法检测肝纤维化指标。实验数据采用SPSS19.0统计软件进行分析,组间比较,当P<0.05时,差异有统计学意义。结果：1.肝脏病理学观察造模12周时,模型1组肝组织病理切片光镜下已见纤维条索由汇管区及中央静脉分离出,包绕肝小叶,有形成假小叶之势或者已经形成假小叶。60天后,模型2组肝组织病理切片光镜下已见中央静脉及汇管区明显纤维组织增生,较模型1组已有明显纤维桥连接及假小叶形成。2.肝功能及肝纤维化指标模型2组AST、ALT、GLB较正常组及模型1组均显著升高(P<0.01或P<0.05),三甲散组AST水平较模型2组显著下降(P<0.01),较正常组无明显变化(P>0.05),GLB较正常组升高(P<0.05),鳖甲片组AST水平较模型2组显著下降(P<0.01),较正常组、三甲散组无明显变化(P>0.05)。模型2组HA、LN、CIV、PCIII水平较其余四组均有不同程度的升高(P<0.01或P<0.051,三甲散组PCⅢ、LA水平均较正常组升高(P<0.01或P<0.05),PCⅢ、HA及LN水平较模型2组均下降(P<0.01或P<0.05),鳖甲片组PCⅢ、 LA水平均较正常组升高(P<0.01或P<0.05),HA、LN、PCⅢ水平较模型2组均下降(P<0.01或P<0.05),与三甲散组比较,无差异(P>0.05)。3.微血管密度(MVD)造模各组大鼠MVD均高于正常组(P<0.01或P<0.05),模型2组MVD显著高于三甲散组及鳖甲片组(P<0.01),与模型1组无差异(P>0.05),三甲散组MVD显著低于模型2组大鼠(P<0.01),与鳖甲片组比较无差异(P>0.05)。4.HIF-1α/VEGFA/VEGFR-2及PDGFB/PDGFR-P信号通路模型1组较正常组VEGFA蛋白表达上升(P<0.05),模型2组较正常组各项蛋白均有不同程度的升高(P<0.01或P<0.05),三甲散组与正常组比较,VEGFA及PDGFR-β表达均上升(P<0.05),HIF-1α表达下降(P<0.01),与模型2组比较,HIF-1 α、VEGFR-2及PDGFB表达均下降(P<0.05),与鳖甲片组比较,HIF-1α及VEGFR-2表达下降(P<0.05),鳖甲片组与正常组比较,VEGFA、VEGFR-2与PDGFR- β蛋白表达均升高(P<0.05),与模型2组比较PDGFB表达下降(P<0.05),与三甲散组比较,PDGFB表达无差异(P>0.05)。模型2组HIF-1 α、 VEGFA、VEGFR-2、PDGFB及PDGFR-βmRNA水平均高于正常组(P<0.01或P<0.05),三甲散组HIF-1 α、VEGFR-2及PDGFBmRNA水平均低于模型2组(P<0.01),与正常组无明显差异(P>0.05)。结论：1.根据病理形态观察、肝功及肝纤维化指标,提示采用猪血清腹腔注射12周能成功复制大鼠免疫性肝纤维化模型。模型时间越长,肝脏纤维化程度越高,且血清肝纤维化指标异常越明显。2.加减三甲散组大鼠血清AST、HA、LN及PCⅢ水平均低于模型2组,提示加减三甲散可改善肝纤维化大鼠肝纤维化指标,具有一定的抗肝纤维化效果。3.加减三甲散组大鼠MVD水平显著低于模型2组大鼠MVD水平,提示加减三甲散可抑制病理性微血管增生,其抗肝脏纤维化的机制可能与此相关。4.加减三甲散组大鼠HIF-1 α、VEGFR-2、PDGFB蛋白及mRNA的表达均低于模型2组,提示加减三甲散可抑制肝纤维化大鼠肝脏病理性血管新生的机制可能是通过改善大鼠肝脏微循环,缓解肝脏缺氧状态,下调HIF-1α、VEGFR-2、 PDGFB蛋白及mRNA的表达,进而影响能够引起病理性血管新生的重要信号通路HIF-1α/VEGFA/VEGFR-2及PDGFB/PDGFR-β实现的。