论文部分内容阅读
1.综述了茶多酚、儿茶素单体以及茶多糖的结构性质、提取分离、分析检测和应用现状,并对各种提取分离方法和分析检测方法的优缺点进行了比较。2.以日照绿茶为实验原料,采用正交实验及单因素平行实验的方案,分析了料液比、浸提时间和浸提温度对茶多酚和茶多糖萃取效果的影响,同时研究了茶叶粒度、搅拌等对萃取效果的影响。优化得出了如下的提取方案:在搅拌的条件下,用茶叶质量20倍的蒸馏水在70℃分2次浸提,每次浸提45min,在此条件下,茶多酚的水提含率为15.76%,茶多糖的水提含率为2.78%。3.为了将提取的茶多酚和茶多糖分离出来,采用平行实验的方案,以提取实验得到的浸提液为原料,研究了乙酸乙酯的萃取次数对茶多酚实际得率的影响,以及95%的乙醇体积倍数对茶多糖实际得率的影响。优化得出了如下的分离方案:将浸提液浓缩至固含量为5%,再用等量的乙酸乙酯萃取2次,分离茶多糖的乙醇用量为水相体积的3倍。在此条件下,茶多酚的实际产率为21.53%,茶多糖的实际产率为3.01%。4.采用Sevag法、三氯乙酸法和鞣酸法,对日照绿茶粗多糖进行脱蛋白研究,结果表明:Sevag法茶多糖含量较高,但茶多糖保留率较低,并且需重复多次,效率低,有毒性溶剂残留;鞣酸法茶多糖保留率较高,但脱蛋白率和茶多糖含量较低;三氯乙酸法在蛋白质脱除率、茶多糖保留率和茶多糖含量三个方面的综合指标较理想,当pH值为4.0时,蛋白质脱除率达到68.4%,茶多糖保留率为66.8%,茶多糖的含量为72.5%。5.采用双氧水法和AB-8树脂法,对日照绿茶粗多糖进行脱色研究,得到的最佳工艺条件为:1)双氧水法:双氧水添加量为多糖溶液体积的60%,调节pH为9.0,在50℃水浴下保温3h。此条件下,脱色率达65.1%,茶多糖保留率为76.4%。2)AB-8树脂法:用稀盐酸调节pH为4.0,恒温振荡1h。此条件下,脱色率为79.2%,茶多糖保留率为58.5%。6.为了得到高纯度的EGCG单体,用AB-8树脂和LH-20凝胶树脂对茶多酚粗品进行初步纯化和二次纯化研究,结果表明:1)蒸馏水作溶剂时AB-8树脂对儿茶素单体的吸附性能最好,此时树脂对TP总量的吸附达63.08mg/g,对EGCG单体的吸附量为33.87 mg/g,对ECG单体的吸附量为7.69 mg/g。随着乙醇浓度的增加,AB-8树脂对茶多酚总量和各儿茶素单体的吸附能力降低,无水乙醇的解吸性能最好。用无水乙醇对AB-8树脂柱进行动态洗脱,流速为1.0-1.5 mL/min,收集富含EGCG和ECG的流分,测得EGCG的含量为78.32%。2)以浓度为50%和75%的乙醇溶液解吸LH-20凝胶树脂,结果显示两者对EGCG和ECG两种单体的解吸率相差都比较大,差值约为23%。但50%的乙醇溶液的解吸率要低于75%的乙醇溶液的解吸率,且流速慢,不易操作,所以选用75%乙醇溶液做洗脱剂。收集到富含EGCG和ECG的流分浓缩后上LH-20凝胶柱,以75%的乙醇溶液作为洗脱剂洗脱,流速0.6 mL/min,收集富含EGCG的流分,测得EGCG的含量为94.76%。