维科天然生物制剂是以甜叶菊残渣、菊花等为主要成分精制而成的天然生物制剂。研发者对维科生物制剂的多种生物活性进行了多方面的研究,发现了其具有抗氧化、抗过敏等多种生物活性,奚印慈发现维科生物制剂具有很强的抗氧化性,并于1998年在日本食品工学会上正式发表了世界第一篇关于甜叶菊(维科制剂)抗氧化的论文[1]。维科生物制剂强抗氧化作用的主要物质基础是多酚类物质,这是对维科生物制剂的强抗氧化活性成分进行分离纯化和结构鉴定所得出的结果,是于慧等人在奚印慈研究基础上所作出的研究[2],而且预防高血压、高血糖、肥胖症、心脏病等也是维科生物制剂所具备的功效[3-5]。干酪乳杆菌是卫生部2001年公布的益生菌之一,它的来源很广,不仅新鲜的蔬菜和瓜果自身含有少量的益生菌,而且乳酸发酵的产品也是益生菌很好的来源[6]。国内外对益生菌研究的热点是关于植物乳杆菌、嗜热乳杆菌、双歧杆菌及保加利亚链球菌等菌株在肉产品中的研发,但干酪乳杆菌主要的应用是在发酵剂的产品中。乳酸菌发酵剂具备发酵活力强、接菌量少、活菌含量高、使用简便及保藏期长等优点而被应用到食品工业中。为了干酪乳杆菌得到更好的实际应用,研究者们对其做了大量研究。如采用6%的胡萝卜汁、8%的西红柿汁、0.04%的抗坏血酸作为菌株的营养环境与液体培养基作对比是刘冬梅等人所进行的研究,证明了含有2.5倍氮源的培养基对干酪乳杆菌的成长有一定的正面影响,使干酪乳杆菌的活菌数达到了109cfu/m L[7]。由于对宿主有免疫、防病等显著的益生功效,干酪乳杆菌成为人们探究和生产的核心菌株。本实验将植物废弃资源的维科天然生物制剂用到菌种的生长条件中,找出了干酪乳杆菌最优的培养条件及最优增菌条件。(1)采用响应面实验设计,分析得到的结果是在温度为39.51±0.06℃,培养基起始pH为6.16±0.04,接种量为1.34±0.03%,维科天然生物制剂浓度为12.56±0.04mg/m L的静置培养12h后,干酪乳杆菌的OD610nm值达到了2.227±0.05,菌落数高达7.3×109 cfu/m L。(2)为了提高干酪乳杆菌的活菌数,用响应面分析法得到的摇床培养的最优条件:温度为38.96±±0.04℃,培养基起始pH为5.98±±0.02,接种量为1.19±±0.03%,维科天然生物制剂浓度为12.62±±0.04 mg/mL的培养过程中可以加入15%Na2CO3溶液,并且其最佳高密度培养的离心条件为4000r/min 20min和以100%的最优培养摇瓶装液量,增殖培养后菌液经4000 r/min 20min后离心收得率最高,不但强化了培养基的营养,还添加了碱液来缓冲培养基内的酸,为乳酸菌增殖提供足够的营养且很好地阻止了乳酸菌的过分“自溶”,同时对离心条件也进行了探究,保证了很高的离心收得率和较高的活菌含量。(3)将维科生物制剂来源的干酪乳杆菌与标准菌株作对比,在pH值为1.5~4.5人工胃液和肠液中培养3 h后都有活菌存在,活菌数高达到1010cfu/mL,同时在7.5%的高盐条件下也可以生长。说明这两株干酪乳杆菌均具有较好的适应性,并且维科生物制剂来源的干酪乳杆菌比标准菌更能适应人体的消化道环境,作为益生菌在功能性食品的研究和开发中,用于食品产业具有一定的应用前景。维科天然生物制剂在微生物方面的活性研究较少,本实验将维科天然生物制剂应用到干酪乳杆菌的生长中,结合不同的培养条件,采用响应面实验设计,找出最优条件及最优增菌条件,旨在为开发一种新的促进干酪乳杆菌生长的培养方法提供依据,且对维科生物制剂来源的干酪乳杆菌的适应性做了探究。本实验不仅有效地利用天然植物资源(维科制剂),为保护地球环境作出了点滴贡献,而且对维科生物制剂来源干酪乳杆菌的应用提供了理论依据。