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金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)是一种重要的昆虫内寄生真菌,其寄主范围广,致病力强,对人、畜、农作物无毒、无残留,具有广阔的应用前景。紫外线是制约金龟子绿僵菌菌剂田间应用的重要因素之一。本论文通过连续紫外诱变筛选到5代高毒力菌株,进行了诱变菌株生长特性、胞外酶等生物学特性研究,并测定其田间防治效果。(1)出发菌株的筛选及鉴定。采用浸虫法以黄粉虫为试虫对分离的23株菌株进行毒力测定,以致死中时LT50为指标,获得了高毒力菌株M18-8-4作为紫外诱变的出发菌株,其致死中时为3.68 d,僵虫率为100%;经形态学和分子鉴定,M18-8-4菌株为金龟子绿僵菌。(2)金龟子绿僵菌M18-8-4的紫外线诱变育种和高毒力诱变菌株的筛选。根据紫外线照射时间与金龟子绿僵菌孢子存活率的关系,在孢子存活率为20%时,利于正向突变,确定紫外诱变时长为5min。以金龟子绿僵菌M18-8-4为出发菌株进行紫外诱变,以黄粉虫为试虫进行毒力测定,从最早发病死亡的僵虫上分离得到菌株F1-M18-8-4作为第一代诱变菌株,直至得到F5代诱变菌株。分别以黄粉虫(Tenebrio molitor)、花生蚜(Aphis medicaginis)、西花蓟马(Frankliniella occidentalis)、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)和蛴螬(Holotrichia parallela)为试虫对诱变菌株进行毒力测定,结果显示F2代诱变菌株F2-M18-8-4对多种试虫的毒力均表现最高,致死中时分别为 2.76 d、3.16 d、2.13 d、2.31 d、2.86 d。(3)金龟子绿僵菌诱变菌株F2-M18-8-4生物学特性研究。形态学鉴定结果显示,出发菌株M18-8-4正面粉状橄榄绿色,边缘为少量白色菌丝,背面淡黄色;诱变菌株F2-M18-8-4正面为粉状橄榄绿色,边缘长有大量绒毛状菌丝,菌落呈同心圆生长,背面与出发菌株无明显差异。在菌落生长速度上,第2d诱变菌株F2-M18-8-4与出发菌株无显著差异;第4d、6d诱变菌株F2-M18-8-4菌落生长速度显著高于出发菌株,第4 d、6 d的生长直径达到3.85cm、5.38cm。产孢量上,培养7 d后诱变菌株F2-M18-8-4的产孢量达到0.74×107个孢子/cm2,显著高于出发菌株的产孢量,紫外线照射后诱变菌株F2-M18-8-4的存活菌落数为37.50个/皿,与出发菌株存活菌落数31.40个/皿有显著差异。(4)金龟子绿僵菌诱变菌株F2-M18-8-4胞外酶活性研究。诱变菌株F2-M18-8-4的蛋白酶活性测定结果显示,F2-M18-8-4的蛋白酶活性为30.66 IU/mL,显著高于出发菌株;几丁质酶活性为53.64 IU/mL,显著高于出发菌株;诱变菌株F2-M1 8-8-4与出发菌株脂肪酶活性无显著差异。(5)金龟子绿僵菌诱变菌株F2-M18-8-4田间防效试验。诱变菌株F2-M18-8-4分别对花生地上害虫花生蚜、西花蓟马和地下害虫蛴螬进行田间试验,以对害虫的防治效果和对花生的保叶效果、增产效果为指标,评价了诱变菌株F2-M18-8-4对花生田害虫的防治效果。试验结果表明:喷施F2-M18-8-4菌液3d后对花生蚜和西花蓟马的防治效果低于25%吡虫啉可湿性粉剂、25%噻虫嗪水分散剂和60g/L乙基多杀菌素悬浮剂,之后对花生害虫防效呈上升趋势,第15d,诱变菌株F2-M18-8-4对花生蚜和西花蓟马防治效果分别为83.33%和79.52%,显著高于3种化学农药。在花生保叶效果上,施药后15 d诱变菌株F2-M18-8-4对花生保叶效果达到63.58%。对地下害虫蛴螬的防治效果上,300万亿孢子/hm2诱变菌株F2-M18-8-4的产量为5780.80 kg/hm2,增产效果为16.55%,与225万亿孢子/hm2金龟子绿僵菌CQMa128乳粉剂相当。综上所述,紫外诱变可以提高金龟子绿僵菌M18-8-4的毒力;改良金龟子绿僵菌的生物学特征,提高蛋白酶和几丁质酶活性;诱变菌株F2-M18-8-4对花生田害虫有良好的防治效果。