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目的:从苦参、百部中提取生物碱,并优化提取条件;应用高速逆流色谱法对苦参、百部总生物碱进行分离提纯;检测苦参生物碱的抗菌作用和体外抗氧化活性,为其产品的开发和应用提供参考依据。方法:1.采用醇提法从苦参、百部中提取总生物碱,并用不同乙醇浓度对醇提法提取苦参生物碱的条件进行优化。2.应用HPLC测定优化高速逆流色谱法的溶剂系统的分配系数,并探讨流速、转速对苦参、百部生物碱分离的影响。在此基础进行生物碱的制备,并用红外光谱对苦参峰进行分析。3.采用杯碟法和对倍稀释法测定苦参生物碱对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、嗜水气单胞菌、枯草杆菌对抑菌效果和最低抑菌浓度(MIC)。应用扫描电镜方法观察苦参生物碱对大肠杆菌形态结构的影响。4.应用苦参生物碱体外对羟自由基(OH-)和超氧阴离子(O2(?))的清除、抑制H2O2诱导小鼠红细胞氧化溶血性等来研究苦参生物碱抗氧化活性。结果:1.苦参、百部的总生物碱得率分别为15.2%和16.8%;苦参醇提法的优化条件是:温度为80℃,提取时间为4 h,提取次数3次,料液比为1:10,乙醇浓度为85%。2.苦参、百部总生物碱的溶剂系统分别为氯仿-甲醇-pH5.4磷酸二氢钠水溶液(4:3:2)、氯仿-甲醇-水(4:3.5:2)体系,流速2mL/min,转速为650转/min。苦参峰2红外光谱分析具有典型生物碱图谱特征。3.20mg/mL苦参生物碱对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜水气单胞菌的抑菌圈分别是18.8、12.6和6.4mm,MIC分别是5、8和20mg/mL,而对沙门氏菌、枯草杆菌无抑菌作用。扫描电镜观察,苦参醇提物使大肠杆菌的菌体形态结构发生明显变化,表现为菌体固缩变形,中间凹陷,呈规则元宝状,严重者细胞壁破损,内容物外泄。4.苦参生物碱对氧损伤的抑制作用均表现量效关系。在生物碱浓度为3.0mg/mL时,对超氧阴离子的清除率最高为53.7%;在生物碱浓度为5.0 mg/mL时,其对羟自由基清除率达42.10%,对H2O2诱导的小鼠红细胞氧化溶血的抑制率可达35.10%,这证实了苦参生物碱具有明显的体外抗氧化作用。结论:优化总生物碱的工艺与条件,总碱提取率高,条件温和,操作简单,易于实现产业化;HSCCC可以较好的分离苦参、百部总生物碱;苦参生物碱具有体外抗菌和抗氧化等活性功能。