基于ROCK/LIMK1/Cofilin信号通路探讨推拿对膝骨关节炎大鼠软骨的影响

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目的探讨推拿疗法通过ROCK/LIMK1/Cofilin信号通路对膝骨关节炎模型大鼠的治疗效果。方法将50只SPF级SD大鼠随机分为空白组、模型组、推拿组、塞来昔布组、推拿联合塞来昔布组,使用4%木瓜蛋白酶0.2m L关节腔注射建立膝骨关节炎模型,造模成功后各组进行相应干预。推拿组于梁丘、血海、内膝眼、外膝眼、足三里等穴位施以按揉法,纵向压力4~6N,频率控制为110~130次/min,各穴位2min,屈伸关节10次,塞来昔布组施以塞来昔布24 mg·kg-1·d-1灌胃,推拿联合塞来昔布组予以上两种治疗,1天1次,连续6天,间隔1天,连续4周。治疗4周后进行取材,取右侧股骨行HE染色观察软骨形态,取外周血用ELISA检测IL-1β、TNFα、BGP、OPG,取右侧胫骨平台软骨用Western Blot法检测细胞骨架蛋白ROCK、LIMK1、Phospho-LIMK1、Cofilin、Phospho-Cofilin蛋白含量变化。结果推拿组、塞来昔布组及推拿联合塞来昔布组的HE染色形态结果及Mankin评分均优于模型组。与空白组相比,模型组血清中的IL-1β、TNF-α的含量均增加(P<0.01),BGP、OPG的含量均减少(P<0.01),软骨组织中ROCK、LIMK1、Phospho-LIMK1、Cofilin、Phospho-Cofilin的表达水平均上升(P<0.01)。与模型组相比,推拿组、塞来昔布组及推拿联合塞来昔布组的大鼠血清中IL-1β、TNF-α的含量均减少(P<0.01),BGP、OPG的含量均增加(P<0.01);推拿组及推拿联合塞来昔布组大鼠软骨组织中ROCK、LIMK1、Phospho-LIMK1、Cofilin、Phospho-Cofilin的表达水平均下降(P<0.01)。塞来昔布组大鼠软骨组织中上述蛋白的表达较模型组无统计学意义(P>0.05)。结论治疗膝骨关节炎推拿疗法较口服塞来昔布对于炎症因子的抑制及骨代谢的改善拥有更好的疗效,且推拿可能通过下调ROCK/LIMK1/Cofilin信号通路相关蛋白的表达,抑制细胞骨架的重排,从而减缓膝关节关节炎的退变。
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