为了研究β-外毒素的生态安全性,本实验采用两水相系统,从苏云金杆菌库斯塔克亚种和苏云金亚种的培养上清液中分离出β-外毒素,用紫外分光光度计测定了其OD值曲线,并用落叶松毛虫幼虫进行了β-外毒素的生物测定,确定了提取出的β-外毒素具有杀虫活性。分别进行了β-外毒素对落叶松毛虫的野外毒力测定;对落叶松种子发芽率及种芽生长、落叶松毛虫卵期天敌寄生蜂的影响、落叶松林下土壤微生物的影响;以期为B.t.生物制剂的施用安全性提供依据。 本论文实验结果如下: (1)采用两水相系统从苏云金杆菌库斯塔克亚种和苏云金亚种培养上清液中提取了β-外毒素,经紫外分光光度计检测,证明为苏云金杆菌β-外毒素。 (2)β-外毒素对落叶松毛虫幼虫的室内毒力测定表明,库斯塔克亚种β-外毒素100和200倍液对落叶松毛虫幼虫的校正死亡率分别为57.1%和28.5%;苏云金亚种β-外毒素100和200倍液对落叶松毛虫幼虫的校正死亡率分别为49.9%和7.1%。 (3)在林间应用苏云金杆菌库斯塔克亚种和苏云金亚种β-外毒素对落叶松毛虫幼虫毒力测定结果表明,库斯塔克亚种β-外毒素的100和200倍液对落叶松毛虫幼虫的校正死亡率分别为69.7%和18.6%;苏云金亚种β-外毒素100和200倍液对落叶松毛虫幼虫的校正死亡率分别为65.5%和16.3%;Bt制剂100和200倍液对落叶松毛虫的校正死亡率分别为76.9%和59.0%。方差分析表明,库斯塔克亚种、苏云金亚种β-外毒素和Bt制剂及不同浓度之间存在极显著差异。 (4)库斯塔克亚种β-外毒素100和200倍液处理的落叶松种子平均发芽率分别为30±2.5%和31.3±0.76%;苏云金亚种β-外毒素100和200倍液处理的落叶松种子平均发芽率分别为30.2±2.02%和31±2.78%;清水对照的落叶松种子平均发芽率为34.3±1.04%。与对照相比,用β-外毒素处理的落叶松种子发芽率略低于对照,但抑制效果并不显著。 库斯塔克亚种β-外毒素100和200倍液处理的落叶松种芽平均长度分别为2.1±0.36cm和2.0±0.32cm;苏云金亚种β-外毒素100和200倍液处理的落叶松种芽平均长度分别为:2.6±0.15cm和2.6±0.21cm,清水对照处理的芽平均长度为3.2±0.15cm。与对照相比,β-外毒素处理的芽长度短于对照,对落叶松芽生长具有抑制作用,且库斯塔克亚种β-外毒素比苏云金亚种β-外毒素抑制作用强。 (5)β-外毒素对落叶松毛虫黑卵蜂和落叶松毛虫卵跳小蜂具有杀伤作用,库斯塔克亚种β-外毒素100和200倍液对落叶松毛虫黑卵蜂的校正死亡率分别为59.2%和16.8%,苏云金亚种β-外毒素100和200倍液对落叶松毛虫黑卵蜂的校正死亡率分别为49.7%和7.0%。对落叶松毛虫卵跳小蜂的校正死亡率为3.1%～74.1%。 (6)从落叶松林下土壤中分离纯化出5种优势真菌和5种优势细菌,通过形态学和