台湾乳白蚁脂肪酸去饱和酶的功能研究

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台湾乳白蚁Coptotermes formosanus是一种对农业以及木质建筑危害性很高的昆虫,其体内含有大量的不饱和脂肪酸,影响白蚁的能量代谢和各种社会行为,包括信息素的合成、表皮形成、能力储存和抗寒耐旱等特性。在众多参与脂肪酸类化合物合成的催化酶中,脂肪酸去饱和酶在不饱和脂质的合成反应中起到十分关键的作用,与白蚁体内的油酸、亚油酸等不饱和脂肪酸的合成密切相关,但目前为止,脂肪酸去饱和酶desaturase对白蚁体内各种不饱和脂肪酸的组成和含量,以及对白蚁的行为和生理的调节作用仍无明确的定位。本研究以台湾乳白蚁为研究对象,研究脂肪酸去饱和酶在白蚁的行为和生理中的功能。本研究结果为白蚁间的信息交流提供新的视角,并为白蚁的防治提供参考。主要研究结果如下:1.对台湾乳白蚁全虫转录组数据进行分析,发现7条第一去饱和酶家族基因,通过构建系统进化树,将鉴定所得的7个脂肪酸去饱和酶基因分类为Cfor-desats A1,Cfor-desat A2-a,Cfor-desat A2-b,Cfor-desat B-a,Cfor-desat B-b,Cfor-desat D,Cfor-desat E。通过基因扩增获得Cfor-desats基因全长,分析基因结构,并预测其作用方式以及功能。利用定量PCR检测了Cfor-desats基因在工蚁不同组织中的表达水平(头,肠道,脂肪体以及表皮)。本研究发现Cfor-desats基因在台湾乳白蚁的表皮以及脂肪体中高表达,表明去饱和酶可能与白蚁外表皮的合成或代谢生理过程密切相关。2.通过合成Cfor-desats基因相对应的双链ds RNA,本研究对台湾乳白蚁工蚁进行RNAi处理。收集干扰5天后的工蚁进行提取脂质GC分析,发现ds Cfor-desat A2-a与ds Cfor-desat A2-b处理组的工蚁体内的不饱和脂肪酸油酸含量显著下降。通过NMDS(non-metric multidimensional scaling)相似性分析,显示ds Cfor-desat A2-a,ds Cfor-desat A2-b,ds Cfor-desat B-b处理组工蚁体内的脂质相比其他组变化大,是影响工蚁体内脂肪酸组成的关键酶。3.在干扰去饱和酶基因10天内导致工蚁存活率出现降低。同时,在ds Cfor-desat A2-b处理组中正常兵蚁与被干扰的工蚁一起饲养也表现出更高的死亡率。据此推测,白蚁去饱和酶是脂肪酸合成的关键基因,其调节的产物可通过白蚁品级之间的交哺等社会行为进行传递。
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