丹皮酚及其胃漂浮片抗胃溃疡药效研究

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目的:研究丹皮酚及其胃漂浮片对乙醇致胃黏膜损伤模型、幽门结扎型胃溃疡模型和乙酸烧灼型胃溃疡模型三种胃溃疡模型的药效;建立丹皮酚胃漂浮片中试样品的质量标准;探索丹皮酚对大鼠肠道菌群的影响。以上研究将为丹皮酚胃漂浮片治疗胃溃疡新药的开发,提供前期研究基础。方法:1.按照2015版《中国药典》相关规定,对丹皮酚胃漂浮片中试样品进行质量评价,包括外观、重量差异、释放度、体外漂浮性能、含量测定、稳定性等。2.本论文采用乙醇致胃粘膜损伤模型、幽门结扎型胃溃疡模型、乙酸烧灼型胃溃疡模型,评价了丹皮酚及其胃漂浮片对胃溃疡的药效作用,并对幽门结扎型和乙酸烧灼型胃溃疡模型的大鼠血清中SOD活力和MDA含量进行测定,对幽门结扎型大鼠胃中游离酸、总酸进行测定,对三种模型大鼠胃组织进行病理组织形态观察和溃疡面积的测定。3.分别收集丹皮酚和阳性药奥美拉唑给药前后大鼠粪便,抽提粪便DNA,进行PCR扩增,根据Illumina Mi Seq平台测序,进行大鼠肠道菌群的多样性分析,探索丹皮酚对大鼠肠道菌群的影响。结果:1.建立了丹皮酚胃漂浮片中试样品的质量标准草案,平均每片中的丹皮酚含量为39.12%,其外观、释放度、体外漂浮性能符合规定,6个月内稳定性良好。2.药效实验显示,丹皮酚对乙醇致胃粘膜损伤模型有一定的抑制作用,丹皮酚高剂量组的溃疡抑制率为67.47%(p<0.001);丹皮酚对幽门结扎型胃溃疡有一定的抑制作用,丹皮酚高剂量组的溃疡抑制率为52.17%(p<0.001),对胃液总酸度有明显抑制作用,可减少攻击因子对胃壁的侵蚀和伤害,同时降低大鼠血清中MDA的含量,增强SOD的活力;丹皮酚对乙酸烧灼型胃溃疡有一定的治疗作用,给药3天丹皮酚高剂量和胃漂浮片低、中、高剂量组的治疗效果显著高于阳性药,给药7天胃漂浮片高剂量组溃疡抑制率为68.20%(p<0.001),显著高于阳性药组,同时丹皮酚降低大鼠血清中MDA的含量、增强SOD的活力,丹皮酚胃漂浮片组和丹皮酚组相比,显著性降低MDA,病理切片结果也显示出制剂优势,其中给药7天高剂量组的治疗效果最好。3.大鼠肠道菌群多样性分析表明,在门水平各组样品中微生物相对丰度最大的是厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、疣微菌门(Verrucomicrobia)、变形菌门(Proteobacteria)、Patescibacteria和脱铁杆菌门(Deferribacteres)。各组样品的优势菌门是厚壁菌门和拟杆菌门,占据了90%以上。丹皮酚给药后,改变了肠道菌群多样性,使有益菌增多,例如乳杆菌属(p<0.01),阳性药奥美拉唑给药后,使致病菌增多,例如布劳特氏菌属(p<0.05)、瘤胃球菌属(p<0.01)。结论:丹皮酚对胃溃疡具有抑制和治疗作用,其抗溃疡机制可能与增强SOD的活力、降低MDA的含量、抑制胃酸作用相关,丹皮酚胃漂浮片治疗乙酸灼烧型胃溃疡的作用有显著制剂优势,丹皮酚还具有改变肠道菌群多样性,增加乳杆菌属等有益菌的作用。
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