水稻矮缩病毒分子生物学研究

来源 :西北农业大学 西北农林科技大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:taiyangkaimen
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该文对水稻矮缩病毒(rice dwarf virus, RDV)基因组第二号基因片段开展了基因分离、基因克隆、序列测定、序列分析以及基因表达等研究,为阐明该病毒基因组的结构特征,功能和复制机理奠定基础.通过氯仿处理、聚乙二醇沉淀、蔗糖梯度离心和差速离心等步骤,从感病水稻叶片中分离纯化了水稻矮缩病毒-中国福建株系.在电镜下观察,病毒粒子呈球形,直径约70nm.纯化的RDV粒子经蛋白酶K消解、苯酚和氯仿抽提,获得了RDV的总RNA.此外,该文还对RDV S8编码蛋白进行了基因定位研究.用RDV P8蛋白的抗血清对RDV病毒粒子进行免疫修饰,发现P8抗体可以对RDV病毒粒子表面进行修饰,而且P8抗体与粒子表面的抗原位点是均匀结合.用RDV P8蛋白抗体对RDV病毒粒子进行蛋白A-胶体金标记时,在电镜下观察到胶体金颗粒存在于病毒粒子的外层,每个病毒粒子上吸附多个胶体金颗粒,这些颗粒呈均匀分布.因此作者首次通过免疫修饰和蛋白A-胶体金技术证实RDVS8编码蛋白位于病毒粒子的表面,而且是一种外层蛋白.
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