人肺腺癌细胞的CD133表达及CD133阳性人肺腺癌细胞的干细胞特性研究

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肿瘤干细胞(TSC)是肿瘤组织中一小部分具有自我更新、无限增殖和多向分化能力的肿瘤细胞,它在肿瘤组织中所占比例虽然很少,却与肿瘤起源、发展与转移关系密切。CD133蛋白是在人类造血干细胞上发现的一种跨膜糖蛋白,并认为是多种干细胞的表面标志之一。2008年Eramo等首次报道了肺癌TSC表面表达CD133。2009年Tirino等对89例NSCLC患者的活体肿瘤组织通过流式检测仪进行研究,发现89例中有72%表达CD133,CD133阳性肺癌细胞较阴性细胞在其后的实验中表现了更强的致瘤能力。本实验将通过免疫组化方法检测CD133在人肺腺癌组织病理切片中的表达情况,采用流式细胞仪对10例新鲜人肺腺癌组织进行研究,并对分选得到的CD133+和CD133-肿瘤细胞进行干细胞特性的对比研究。第一部分CD133在人肺腺癌组织中的表达及与患者临床资料的关系目的:研究CD133在肺腺癌组织中的表达情况,探讨CD133表达与患者临床信息的相关性。方法:选取83例肺腺癌患者病理组织石蜡标本,采用免疫组化法检测CD133蛋白的表达,并结合患者年龄、性别、吸烟指数、淋巴转移、分化程度等信息进行统计分析,探讨CD133在肺腺癌组织中的表达与患者相关信息的关系。结果:83例肺腺癌患者CD133蛋白阳性表达率为81.9%,同时具有表达的不均一性。结论:CD133在肺腺癌组织中广泛表达,同时表达强度具有不均一性,CD133的表达与患者淋巴转移及病理分化程度有相关性,而与年龄、性别、吸烟指数未见相关性。第二部分CD133阳性人肺腺癌细胞的干细胞特性研究目的:通过流式分选收获CD133阳性人肺腺癌细胞,并评估其侵袭性、致瘤能力及对化疗药物的耐受性,探讨CD133阳性人肺腺癌细胞是否具有TSC的特性。方法:取10例新鲜人肺腺癌组织制成单细胞悬液,CD133标记后行流式分选收获CD133+和CD133-肺腺癌细胞,并对其进行侵袭性实验、耐化疗药物分析、成瘤实验和干细胞标志物的表达等对比研究。结果:10例新鲜人肺腺癌组织中有8例发现CD133表达,其中最高表达强度为13.12%。CD133阳性细胞在侵袭性、小鼠致瘤能力及对化疗药物的耐受能力上明显强于阴性细胞;其表面ABCG2的表达比例分别为4.61%和2.66%,亦有明显差异。结论:CD133在人肺腺癌组织中广泛表达,且表达水平不均,但CD133+较CD133-细胞具有更强的侵袭性、致瘤能力及耐化疗能力,可能富集肺腺癌干细胞。
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