论文部分内容阅读
本文研究了在不同脂质水平的饲料中添加溶血磷脂或α-硫辛酸对大口黑鲈（Micropterus salmoides）的脂代谢机制的影响,主要包括3个部分:1)在低蛋白或低脂饲料中补充溶血磷脂对大口黑鲈的生长性能、脂质代谢和肠道菌群的影响;2)提高饲料脂肪水平对大口黑鲈生长性能、肝脏健康及脂质代谢的影响;3)在高脂饲料中添加α-硫辛酸对大口黑鲈生长性能、肝脏健康、脂质代谢和肠道菌群的影响。实验结果如下:1)配制对照组的日粮[粗蛋白（CP）:50.51%,粗脂肪（EE）:11.45%,PE]、低蛋白添加溶血磷脂组的日粮（CP:48.48%,EE:11.36%,LP-L）和低脂添加溶血磷脂组的日粮（CP:50.34%,EE:10.19%,LE-L）三种营养水平的饲料饲喂大口黑鲈。经过64天的养殖试验,实验结果表明:三组饲料对大口黑鲈的生长性能和形态指标无显著差异（P＞0.05）。LPL组的鱼体粗蛋白显著高于PE组的（P＜0.05）。在LP-L和LE-L组中血清总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、谷草转氨酶（AST）和谷丙转氨酶（ALT）显著降低（P＜0.05）。LEL和LP-L组的肝脏和肠道淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶的活性显著高于PE组（P＜0.05）。PE组的肝脏脂蛋白脂酶（LPL）、脂肪酸合成酶（FAS）、激素敏感性甘油三酯脂肪酶（HSL）和肉碱棕榈酰转移酶1（CPT-1）的活性及基因表达显著低于LE-L和LP-L组（P＜0.05）。三种饲料对肠道微生物群落存在显著影响,提高有益菌相对丰度并降低有害菌丰度,改善大口黑鲈肠道菌群。综上,在低蛋白和低脂肪饲料中补充溶血磷脂对大口黑鲈生长性能没有显著影响,但可以提高大口黑鲈肠道消化酶活性,增强肝脏脂质代谢功能,促进体蛋白沉积,对肠道菌群的结构和多样性有一些影响。2)配制等氮（CP:50%）脂肪水平9.5%（L10）、11.7%（L12）、14.1%（L14）和16.1%（L16）的四种试验饲料,进行4周的饲养试验,构建高脂饲料模型。结果显示:L14组鱼体的增重率（WGR）和特定生长率（SGR）显著高于L10组;L14组鱼体的肝体比（HSI）和脏体比（VSI）显著高于L10组（P＜0.05）;各组饲料对鱼体的存活率（SR）没有显著影响（P（29）0.05）。L14组血清甘油三酯（TG）和TC的含量显著高于L10和L12组;L14组血清AST和ALT活性显著高于L10和L12组。L14组的肝脏粗脂肪含量显著高于L10和L12组。L14组的肝脏粗蛋白含量显著低于L10组,并显著高于L16组（P＜0.05）。肝脏中丙二醛（MDA）和活性氧（ROS）的含量随脂肪水平的升高逐渐降低,谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）的活性逐渐升高。L14组中乙酰辅酶A羧化酶（acc）的表达量显著低于L10和L12组（P＜0.05）;L14组中脂肪甘油三酯脂肪酶（atgl）的表达量显著高于L10组（P＜0.05）;L14组中hsl和过氧化物酶体增殖物激活受体（pparγ）的表达量与其他组差异不显著（P（29）0.05）;L14组中胆固醇调节元件结合蛋白1（srebp1）的表达量显著低于L10和L12组（P＜0.05）。综上,日粮脂质水平在14.10%以上,过高的膳食脂质水平将导致脂质积累,使机体产生氧化应激的风险,诱发肝脏损伤,导致脂肪肝病的产生。3)配制5种α-硫辛酸（α-LA）（0、200、400、600和800mg/kg）浓度的等氮等脂（CP:50%;EE:14%）的试验饲料,养殖试验持续8周。结果显示:200mg/kg组的FBW、WG、SGR和HSI显著高于其他组（P＜0.05）,腹脂率（AFP）显著低于对照组（P＜0.05）,鱼体粗蛋白含量和蛋白质沉积率显著高于其他四组（P＜0.05）,鱼体粗脂肪显著低于对照组（P＜0.05）。各组间存活率和血清TC的含量无显著差异（P（29）0.05）,添加200mg/kg组的TG、AST和ALT显著低于对照组,而HDL-C和LDL-C显著高于对照组（P＜0.05）。高脂饲料中添加α-LA增强肝脏脂肪分解酶的活性（ATGL和CPTI）和基因表达（hsl和atgl）,CPTI酶活性在800mg/kg组显著高于对照组,ATGL酶活性及基因表达在400mg/kg组显著高于对照组,hsl基因表达量在200mg/kg组显著高于对照组（P＜0.05）。脂肪合成基因表达fas和acc在400mg/kg组显著低于对照组,srebp1和pparγ在200mg/kg组显著低于对照组,但fas、acc、srebp1和pparγ在800mg/kg组显著高于对照组（P＜0.05）。与对照组相比,在600mg/kg组显著提高肌肉中花生四烯酸（ARA）和二十二碳六烯酸（DHA）的含量,在800mg/kg组显著提高肌肉中二十碳五烯酸（EPA）的含量（P＜0.05）。200mg/kg组的肝脏空泡化程度、纤维化程度和脂质沉积程度显著低于对照组（P＜0.05）。200mg/kg组肝脏中总抗氧化能力（T-AOC）和GSH-Px的活性显著高于对照组,而ROS和MDA显著低于对照组（P＜0.05）。800mg/kg组肠道微生物多样性指数显著降低（P＜0.05）,且并且增加肠道中有益菌的相对丰度,改善肠道菌群。与对照组相比,200mg/kg组肝脏中26种代谢物发生了明显变化,通过精氨酸和脯氨酸代谢、CAMP的信号通路和味觉转导等途径显著影响机体代谢。综上,α-LA可以有效调节大口黑鲈摄食高脂饲料的生长、抗氧化和脂质代谢。小结:在低蛋白和低脂肪饲料中补充溶血磷脂对大口黑鲈生长性能没有显著影响,但可以提高大口黑鲈肠道消化酶活性,增强肝脏脂质代谢功能,促进体蛋白沉积,对肠道菌群的结构和多样性有一些影响。日粮脂质水平在14.10%以上,过高的膳食脂质水平将导致脂质积累,使机体产生氧化应激的风险,诱发肝脏损伤,导致脂肪肝病的产生。α-LA可以有效调节大口黑鲈摄食高脂饲料的生长、抗氧化和脂质代谢。