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[目的]： 发育毒性的评价方法存在许多难点和重点问题，仍不能完全正确反映出各种外源物在人胚胎发育过程中的毒性等级。本论文旨在一是建立有效的多分子终点法的胚胎干细胞试验(embryonic stem cell test，EST)，对明确体内胚胎发育毒性的各种受试物进行研究评价;二是基于人诱导性多能干细胞(human inducedpluripotent stem cell，hiPSC)建立科学有效的筛选评价发育毒性的体外模型即人诱导性多能干细胞试验(human induced pluripotent stem cell test，hiPST);三是应用上述经证实有效可靠的发育毒性体外模型评价白藜芦醇和甲壳低聚糖的发育毒性，为白藜芦醇和甲壳低聚糖的应用提供详实的发育毒性数据。 [方法]： 1.各种受试物设置不同浓度组，MTT法分别检测各受试物不同浓度对3T3细胞、小鼠胚胎干细胞(Embryonic stem cell，ESC)、人皮肤成纤维细胞(Humansapiens fibroblast cell，HSF)、hiPSC的细胞毒性，于490 nm处测量其吸光度OD值，并绘成浓度-反应曲线，求出相对应的产生细胞半数致死量的受试物浓度即IC503T3、 IC50HSF、IC50ESC、IC50hiPSC。 2.在含有受试物不同浓度的分化培养液中悬滴法培养ESC，悬浮法培养hiPSC，以形成拟胚体(Embryonic body, EB)，然后转移EB至含有相同浓度受试物的分化培养液中贴壁培养继续分化，各浓度组EB数量相同。 3.分化第10天或者第15天时，Real-time PCR检测受试物各浓度分化组细胞的特异基因表达，得到半数抑制分化的受试物浓度ID50值。 4.将三个终点IC503T3、IC50ESC、ID50ESC，另外三个终点IC50HSF、IC50hiPSC、ID50hiPSC代入特定函数公式计算，评价结果与各受试物体内发育毒性数据比较，判断EST和hiPST是否成功建立。 [结果]： 1.各受试物细胞毒性终点IC503T3、IC50ESC，胚胎毒性终点ID50ESC代入函数公式计算后，评价发育毒性结果分别为青霉素无毒性、糖精钠无毒性，丙戊酸弱毒性、氯化锂弱毒性，5-氟尿嘧啶强毒性、羟基脲强毒性，与体内胚胎发育毒性等级相符合。 2.IC50HSF、IC50hiPSC、ID50hiPSC代入函数公式计算后，评价发育毒性结果分别为青霉素无毒性、5-氟尿嘧啶强毒性。与体内胚胎发育毒性等级相符合。 3.经EST和hiPST分别评价，白藜芦醇和甲壳低聚糖均呈无毒性。 [结论]： 1.本实验基于ESC建立的分子终点EST是有效的，且涵盖了早中晚发育的多个早期胚胎发育阶段终点。 2.本实验基于hiPSC已建立科学有效的用于评价预测发育毒性的体外替代模型。 3.用EST和hiPST评价了白藜芦醇和甲壳低聚糖的发育毒性，为白藜芦醇和甲壳低聚糖的应用提供了准确可靠的发育毒性数据。