禽痘是由禽痘病毒属（Avipoxvirus,APV）成员引起家禽、野生鸟类和各种禽类的一种急性接触性传染病,流行范围遍及全球。禽痘的临床症状主要表现在无毛或少毛皮肤部位出现痘疹的皮肤型病变或在禽口腔、咽喉或气管黏膜出现纤维素性痂膜的黏膜型病变。APV主要通过昆虫机械性传播,也可通过气溶胶、破溃皮肤和黏膜传播。禽痘给家禽养殖业带来巨大的影响,同时极大威胁野生鸟类尤其是濒危珍禽。禽痘在鸭和鹅等水禽较为罕见,对其研究尚属空白。本研究对分离得到的鹅源禽痘病毒YNE株和麻鸭源禽痘病毒MDUPV01/GX-2015株的培养特性、理化学特性、血凝特性、蛋白组学等生物学特性和致病特性进行探索。将自然感染的病禽皮肤痘疹组织研磨制备的病毒悬液采用人造气室法接种9-12日龄SPF鸡胚绒毛尿囊膜,连续传代并通过PCR扩增、病理学检查和电镜观察考察其培养特性。APV P4b基因PCR检测结果为阳性;病理组织学检查发现绒毛尿囊膜存在特征性的嗜酸性病毒包涵体;电镜观察到典型痘病毒粒子结构;证实YNE和MDUPV01/GX-2015能在鸡胚绒毛尿囊膜上增殖。理化特性鉴定发现,YNE和MDUPV01/GX-2015分别经55℃30 min和60 min处理后完全丧失感染性;用酸（p H=5）、碱（p H=10）和胰蛋白酶0.5%处理后两株水禽源APV对鸡胚的半数感染量均下降100倍以上;终浓度为5%氯仿处理后病毒丧失感染性;表明这两株水禽源APV毒株均对热、酸碱、氯仿和胰蛋白酶敏感。血凝性检验发现YNE和MDUPV01/GX-2015仅对鹅红细胞有较高凝集活性,凝集效价分别为1:16和1:64,而且该血凝活性可被阳性血清抑制。将YNE和MDUPV01/GX-2015毒株分别在鸡胚上连续传代培养,第5代鸡胚传代毒的鸡胚半数感染量为10^4.14 EID₅₀/0.1 m L和10⁴ EID₅₀/0.1 m L,病毒含量分别10^4.89 Copies/μL和10^4.62 Copies/μL。测定病毒生长曲线,结果表明YNE和MDUPV01/GX-2015分别在接种后第4 d和第5 d增殖达到最高水平,此后病毒生长进入平台期。通过液相色谱串联质谱对纯化的MDUPV01/GX-2015病毒蛋白进行测定,基于生物信息学分析并利用APV蛋白数据库进行筛选,结果共鉴定出108个APV同源蛋白,其中结构蛋白14个、9种与病毒复制或毒力相关的酶,病毒转录因子4个、病毒转录因子4个、蛋白家族成员12个。YNE和MDUPV01/GX-2015毒株对鸡胚的致病性体现于对鸡胚孵化率的影响和造成绒毛尿囊膜的病变。绒毛尿囊膜病理变化表现水肿增厚和痘斑组织的出现。在接毒后第2 d鸡胚绒毛尿囊膜出现增厚现象,接毒后第3d鸡胚绒毛尿囊膜上出现肉眼可见的白色痘斑,此后感染鸡胚绒毛尿囊膜病变表现为持续水肿增重和痘斑增多;检测接毒第9 d后鸡胚的绒毛尿囊膜、尿囊液、喙、喉头、气管、心、肺和脾,结果仅在绒毛尿囊膜中检出病毒。最后,探索了MDUPV01/GX-2015毒株对麻鸭、鸡和鸽的致病性研究。首先筛选最佳接种方式,发现只有刺种方式在接种麻鸭后可观察到典型临床症状,而滴鼻、点眼、滴鼻+点眼、投喂等方式接种后均未观察到临床症状。通过刺种方法接种2×10⁴ELD₅₀/0.1 m L的病毒量于麻鸭、鸡和鸽子。荧光定量PCR检测麻鸭在接种后第3 d、7 d和15 d的各组织脏器病毒分布情况,结果在接毒后第3 d和第7 d的腭、眼周和喙等部位有病毒检出,接毒后第15 d所有皮肤痘疹都有病毒检出且病毒滴度最高,同时喉头、气管、心和肺组织亦可检到病毒,而血清、脑、肝、脾和肾组织均未检出。对接种MDUPV01/GX-2015毒株的鸡和鸽进行连续15 d的观察,分别解剖并采集接毒后第3 d、7 d和15 d的鸡和鸽的组织器官进行病毒检测。结果病毒不能使鸡和鸽出现临床症状,在鸡和鸽各组织脏器中均未检出病毒。本研究结果增加了对水禽源APV生物学特性认识,为禽痘病毒分类学、遗传衍化以及致病机制研究提供基础数据。