【摘 要】
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前言 原发性开角型青光眼(primary open-angle glaucoma,POAG)的发病机制至今尚未明确,倾向于认为遗传因素是主要病因之一。 1993年发现并于1997年被正式命名的第一个
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前言 原发性开角型青光眼(primary open-angle glaucoma,POAG)的发病机制至今尚未明确,倾向于认为遗传因素是主要病因之一。 1993年发现并于1997年被正式命名的第一个青光眼候选致病基因Myocilin(MYOC),是目前为止已报道的29个青光眼相关基因中,唯一得到确认的POAG致病基因。但目前的青光眼致病基因,包括MYOC基因的研究还多集中于突变状态方面,对基因功能的研究尚缺少文献报道,表达产物在青光眼发病机制中的作用也鲜有涉及,这导致人类对各候选基因与青光眼发病间的关系尚不明确。在国内,尚未见有相关基因全长功能区(coding domain sequence,CDS)克隆的研究报道。因此,我们制备出包含全长CDS区的大鼠Myoc基因的cDNA克隆,并利用生物信息学方法分析其可能的蛋白功能,进而探讨其在POAG发病过程中的可能作用。 实验材料与方法 1.实验动物 选择健康Wister大鼠26只,体重在280-320g之间。手术采取每只鼠双眼球的角膜、房角结构、巩膜、色素膜和晶体等组织作为一组,于-76℃深冻冰箱保存。 2.实验方法 2.1 RNA提取。 2.2 RT-PCR扩增、结果检测及目的基因片段纯化。 2.3 纯化后目的基因片段的克隆及克隆鉴定。 2.4 克隆测序。
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