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目的:构建NgR特异性siRNA慢病毒重组体,在新生大鼠缺氧缺血性脑白质损伤模型水平,探讨NgR特异性siRNA慢病毒重组体干扰大鼠NgR mRNA表达及其对新生大鼠缺氧缺血性脑白质损伤的修复作用。方法:1、建立P3新生SD大鼠缺氧缺血性脑白质损伤模型,从生物行为学、组织形态学进行验证。2、设计、构建NgR特异性siRNA慢病毒重组体并鉴定。3、Western Blot方法外源筛靶、内源筛靶,选择最有效的靶点,并包装成慢病毒。4、40只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、空病毒组、慢病毒组(每组10只),新生大鼠缺氧缺血性脑白质损伤3天后(P6)经侧脑室注射给药,观察大鼠的行为学改变。5、80只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、空病毒组、慢病毒组(每组20只),新生大鼠缺氧缺血性脑白质损伤3天后(P6)经侧脑室注射给药,RT-PCR检测P6、P7、P9、P13 SD大鼠NgR mRNA表达情况。结果:1、结扎P3新生SD大鼠双侧颈总动脉建立缺氧缺血性脑白质损伤模型,从生物行为学、组织形态学进行验证,模型组都出现了有意义的改变。2、设计、构建NgR特异性siRNA慢病毒重组体经PCR鉴定、基因测序仪测序,结果与设计序列相符,目的基因序列准确无误,慢病毒重组体构建成功。3、筛选最有效的靶点,包装成慢病毒,慢病毒重组体浓度为:E+9TU/ml。4、模型组、空病毒组和慢病毒组大鼠的行为学相对于假手术组出现明显改变,慢病毒组大鼠恢复情况明显好于模型组和空慢病毒组。5、模型组和空病毒组大鼠的NgR mRNA表达量相对于假手术组明显增高,慢病毒组NgR mRNA表达比假手术组增加,但明显少于模型组和空慢病毒组。结论:本研究采用结扎P3新生SD大鼠双侧颈总动脉建立缺氧缺血性脑白质损伤模型,为后续的实验提供了可靠的动物模型;设计、构建NgR特异性siRNA慢病毒重组体并将其应用到动物模型,在活体动物水平探讨NgR特异性siRNA慢病毒重组体干扰大鼠NgR mRNA表达及其对新生大鼠缺氧缺血性脑白质损伤的修复作用。实验结果说明在活体内经侧脑室注射慢病毒重组体转染后可以实现NgR基因的沉默。本研究认为慢病毒介导的RNA干扰有可能成为治疗缺氧缺血性脑白质损伤的有效手段之一,为进一步应用临床试验提供理论依据。