对虾白斑综合症病毒(White Spot Syndrome Virus,WSSV)是一种具有囊膜的双链DNA病毒,是造成自1993年以来中国、东南亚及美洲等世界范围内大面积暴发对虾病毒性疾病的主要病原。该病传播速度快,感染虾群在3～7d内死亡率高达90～100%,对我国及世界的对虾养殖造成了严重的危害,而目前尚未有有效的防治方法。WSSV的基因组大小为305,107bp,有5个主要的结构蛋白VP28、VP19、VP26、VP24和VP15。 囊膜蛋白是病毒感染与致病力的重要决定因子,WSSV有两个主要的囊膜蛋白VP19和VP28,其中VP28蛋白已被证明在病毒的吸附、侵入过程中起着重要的作用。现已有研究证明利用大肠杆菌表达的WSSV的囊膜蛋白VP28具有提高对虾抗WSSV感染的能力。 鱼的生长激素是一种由鱼的脑垂体分泌的多肽类激素,具有促进鱼的生长发育和调节体内代谢的作用。现研究证明鱼生长激素对某些贝类幼体及对虾苗也有明显的促进生长发育和提高免疫力的作用。 本研究采用逆转录—聚合酶链式反应(RT-PCR)的方法,从鲤鱼脑垂体总RNA中扩增出编码鲤鱼生长激素(GH)成熟肽基因序列,以含vp28基因的质粒为模板,PCR扩增得到vp28目的序列,分别构建了鲤鱼生长激素(GH)的高效表达工程菌株E.coliBL21(DE3)-pET-GH和WSSV囊膜蛋白vp28高效表达工程菌株E.coli BL21(DE3)-pET-vp28。 本研究用大肠杆菌表达鲤鱼生长激素(GH)与WSSV囊膜蛋白vp28,意在利用这两种表达产物的可以提高对虾的免疫能力,尤其是抗WSSV感染的能力的特性,期望将其应用于对虾的水产养殖业中。