甘草核型分析及刺果甘草染色体加倍研究

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甘草为甘肃省五大宗药材之一,同时,还是西部荒漠、半荒漠地区重要的固沙植物。近年来,甘草的需求量大幅度增长,而资源却因破坏严重和生产方式落后而日益紧张。为了追溯甘草属物种种源、寻找新种质资源,以期为缓解甘草资源紧张的局面提供理论依据,本研究以甘草、光果甘草、胀果甘草及刺果甘草为材料,主要做了以下几点研究:1.通过常规制片法对甘草(G. uralensis Fisch.)、光果甘草(G. glabra L.)、胀果甘草(G. inflata Bat.)及刺果甘草(G. pallidiflora Max.)的染色体核型进行了研究,并以臂比值为参数进行了聚类分析。结果表明,甘草、光果甘草、胀果甘草和刺果甘草的核型公式分别为:k(2n)=2x=16=2sm+14m, k(2n)=2x=16=4sm+12m,k(2n)=2x=16=16m,k(2n)=2x=16=16m。光果甘草为四种甘草中较进化的类型,甘草与胀果甘草次之,刺果甘草为最原始的一类,即四种甘草的进化顺序由低到高依次为刺果甘草、胀果甘草、甘草、光果甘草。2.以刺果甘草下胚轴为试验材料,研究了不同浓度的外源激素NAA、2,4-D、6-BA、KT、ZT组合对刺果甘草愈伤组织诱导的影响,并用0.05%、0.1%和0.2%浓度的秋水仙素处理愈伤组织16h、20h、24h,探讨了秋水仙素诱导愈伤组织细胞染色体的倍性变化。结果表明,培养基MS+0.5mg/L NAA+0.8mg/L6-BA诱导愈伤组织出愈率最高,为90.45%,且质地疏松,生长状况良好,是培养刺果甘草下胚轴愈伤组织的最佳组合。用秋水仙素处理刺果甘草愈伤组织,其染色体最低诱变率可达76%,最高达100%。在一定范围内,高浓度、长时间的秋水仙素处理能够诱导愈伤组织染色体加倍,但并不呈倍性增加。3.以刺果甘草的种子为试验材料,分别用0.05%、0.1%和0.2%浓度的秋水仙素处理种子16h、20h、24h,进行刺果甘草多倍体的诱导研究。结果表明,秋水仙素对刺果甘草种子的处理,以0.05%浓度处理16h时诱变率(7.50%)最低,0.2%浓度处理24h时诱变率(88.64%)最高;并在0.1%浓度条件下,处理24h时得到刺果甘草四倍体(4n=4x=32),此时诱变率可达42%。
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