【摘 要】
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目的初步探讨PKC-δ对人原发性肝癌细胞增殖的影响。方法体外实验:体外培养SMMC-7721细胞,目的基因片段的扩增,脂质体介导基因体外转导,通过细胞计数、细胞形态学观察、MTT法
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目的初步探讨PKC-δ对人原发性肝癌细胞增殖的影响。方法体外实验:体外培养SMMC-7721细胞,目的基因片段的扩增,脂质体介导基因体外转导,通过细胞计数、细胞形态学观察、MTT法、流式细胞仪检测技术等方法研究PKC-δ对人原发性肝癌细胞的影响。体内实验:裸鼠背部注射入SMMC-7721细胞,使裸鼠背部长出肿瘤,然后分成三组,分别注射入生理盐水、pcDNA3、PKC-δ,隔天注射一次,记录每次肿瘤的大小并照相,待注射药物十五次后,处死裸鼠,取裸鼠背部肿瘤,做病理切片的HE染色和免疫组化。结果体外实验:细胞计数的生长曲线示转导入PKC-δ的SMMC-7721细胞数目明显减少;MTT法显示转导入PKC-8的SMMC-7721细胞的OD值减小,活细胞数目显著减少(p<0.01);细胞形态学观察转导入PKC-δ的SMMC-7721细胞脱落,连接疏松,失去光泽;流式细胞仪检测到转导入PKC-δ的SMMC-7721细胞凋亡率增加。体内实验:转导入PKC-δ的裸鼠背部肿瘤逐渐缩小,而其它两组肿瘤大小变化不大,HE染色可见转导入PKC-δ的SMMC-7721细胞固缩、变圆,胞核和胞质浓染,胞核呈颗粒状、环形或新月体状,胞质可见“出泡”现象等凋亡形态学变化,免疫组化结果显示转导入PKC-δ的SMMC-7721细胞细胞核蓝染,胞浆出现棕黄色。结论PKC-δ有抑制SMMC-7721细胞增殖,促进凋亡的作用。
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