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目的:原发性肝癌是一种恶性肿瘤,在我国比较常见,在消化系统恶性肿瘤中原发性肝癌的死亡率居于第3位,每年我国死于肝癌的患者大约11万人,中国原发性肝癌的死亡人数占世界范围内的45%。手术切除是治疗肝癌的主要方式,目前没有针对性的治疗药物。中药单体化合物土槿皮乙酸（Pseudolaric Acid B,PAB）是从土槿皮中分离获得的一种新型二萜酸。有研究证明PAB具有抗微管、抗血管生成、抗肿瘤等药理作用。本实验对其抗肝癌作用及作用机制进行了分析。方法:MTT法确定土槿皮乙酸是否具有抑制肿瘤细胞增殖的能力;荧光染色法检测土槿皮乙酸处理后SMMC7721细胞微管聚集情况;土槿皮乙酸处理后的肝癌细胞SMMC7721转移的情况用划痕法来确定;土槿皮乙酸诱导的细胞死亡通过细胞形态学观察细胞形态学变化确定;DNA琼脂糖凝胶电泳确定土槿皮乙酸是否诱导SMMC7721细胞凋亡的发生;流式细胞仪检测土槿皮乙酸对细胞周期的影响;土槿皮乙酸对基因CyclinB1和CDK1的转录的影响用Real-time PCR检测;细胞凋亡和周期相关蛋白的表达应用Western blot方法检测,通过如上方法确定土槿皮乙酸诱导细胞凋亡和周期阻滞的机制。结果:MTT法确定了土槿皮乙酸时间剂量依赖性的抑制SMMC7721细胞的生长;土槿皮乙酸干扰微管的聚集;形态学和琼脂糖凝胶电泳的结果证明在土槿皮乙酸处理48h后,细胞出现了凋亡。Western blot结果发现土槿皮乙酸调节MAPK家族蛋白表达并激活了Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9。抑制DNA损伤反应抑制土槿皮乙酸诱导的细胞死亡。流式细胞术及Western结果确定土槿皮乙酸处理12 h后,细胞出现G2/M周期阻滞,而处理36h后细胞开始向G0/G1滑入。形态学和MTT结果证明CDK1抑制剂可以增加土槿皮乙酸的抗肿瘤效果,而这种作用与MAPK家族蛋白和Caspase活化密切相关。结论:土槿皮乙酸具有抗肝癌细胞SMMC7721的作用,其抗肿瘤作用与土槿皮乙酸诱导细胞凋亡、周期阻滞密切相关。土槿皮乙酸通过活化Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9以及调控MAPK家族蛋白表达来诱导细胞凋亡。土槿皮诱导的细胞死亡与DNA损伤反应密切相关。通过调控细胞周期相关蛋白表达调控G2/M期进入以及G0/G1期滑入。CDK1抑制剂与土槿皮乙酸联合应用能够增强土槿皮乙酸的抗肿瘤效果。