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目的：利用本室培育的人白细胞介素-12(human interleukin 12，hIL-12)转基因马铃薯，探讨hIL-12的纯化工艺，并埘hIL-12的生物学活性进行鉴定。
方法：液氮研磨转基因马铃薯，加入蛋白提取液，离心，对上清液进行超滤，浓缩液经MKF-AIW阴离子交换层析、MKF-CIC阳离子交换层析纯化。在阴离子交换层析吸附过程中采用试管法选择最佳吸附pH值，选择洗脱过程最佳洗脱pH值；选择阳离子交换层析洗脱过程最佳洗脱pH值：ELISA法测定各纯化阶段收集的上清液或洗脱峰中的hIL-12的含量；非还原SDS-PAGE电泳鉴定蛋白纯度；Western Blot检测纯化的hIL-12；ELISA测定纯化的hIL-12诱使外周血单个核细胞(PBMC)产生IEN-γ的量；MTT法检测纯化的hIL-12体外抗肿瘤作用。
结果：转基因马铃薯经粗提获得提取液、超滤得到浓缩液，ELISA测定hIL-12的量，各为717.50±2.85 pg/ml、1638.89±5.92 pg/ml(稀释20倍)。阴离子交换层析吸附过程最佳吸附pH值为7.5，洗脱过程最佳洗脱pH值为7，阳离子交换层析洗脱过程最佳洗脱pH值为6.5。浓缩液经MKF-AIW阴离子交换层析，样品出现4个洗脱峰，经ELISA测定和非还原SDS-PAGE电泳结果分析，第三个峰为目的蛋白峰，收集体积为6ml，hIL-12的含量为725.09±5.49 pg/ml(稀释20倍)，回收率为67.36％，蛋白纯度为66％；样品经MKF-ClC阳离子交换层析后出现3个洗脱峰，经ELISA测定和非还原SDS-PAGE电泳结果分析，第二个峰为目的蛋白峰，收集体积为8ml，hIL-12的含量为318.75±1.30 pg/ml(稀释20倍)，回收率为39.49％，蛋白纯度为91％。WesternBlot分析结果表明，在40KD处有特异的蛋白条带出现。纯化的hIL-12与重组人白介素-12(rhIL-12)在25～400pg/ml浓度范围内，在体外均能刺激PBM产生IFN-γ，并对NK敏感肿瘤细胞K562有杀伤作用，而野生对照组无作用。
结论：hIL-12转基因马铃薯经总蛋白提取，超滤，阴离子交换层析，阳离子交换层析纯化，获得了高纯度的、具有生物学活性的hIL-12。