β-1,3-半乳糖基转移酶2基因敲除对成年小鼠海马区血脑屏障的影响

来源 :锦州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:junxiaohao
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目的通过比较野生型、β-1,3-半乳糖基转移酶2(B3galt2)单基因敲除和B3galt2双基因敲除小鼠大脑海马内血脑屏障的主要结构成分—紧密连接蛋白、脑血管内皮细胞和周细胞的变化,研究B3galt2基因减少和缺失对小鼠海马内血脑屏障中的紧密连接蛋白、脑血管内皮细胞和周细胞的影响,为进一步研究β-1,3半乳糖基转移酶2及其它糖基转移酶在血脑屏障的组成成分中所起到的作用提供理论依据。方法应用β-1,3-半乳糖基转移酶2基因敲除的杂合子小鼠进行繁育,并通过基因组DNA的PCR方法,对出生的小鼠做了基因型鉴定。我们随机将实验小鼠分为六组,为了尽量减少组间误差,所有实验组中的每一组均选取来自同一窝的成年(3-6个月)野生型、杂合子和纯合子小鼠。然后随机选取三组小鼠,用其脑组织做免疫组织化学染色,另外三组做蛋白质免疫印记检测,利用以上两种实验方法我们分别检测了小鼠大脑海马区的内皮细胞、紧密连接蛋白及周细胞的变化。结果1、B3Galt2基因敲除明显降低成年小鼠海马区内紧密连接蛋白的表达水平,并且统计结果显示,P<0.05有统计学意义。2、B3Galt2基因敲除明显降低成年小鼠海马区内皮细胞的表达水平,并且统计结果显示,P<0.05有统计学意义。3、B3Galt2基因敲除明显降低成年小鼠海马区内周细胞的表达,并且统计结果显示,P<0.05有统计学意义。4、B3Galt2与紧密连接蛋白和周细胞有共定位。结论1、B3Galt2基因敲除影响成年小鼠大脑海马区的血脑屏障的主要结构。2、B3Galt2基因可能表达于成年小鼠海马区的紧密连接结构和周细胞中。
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