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脂联素(Adiponectin)是脂肪组织特异性分泌的一种脂肪细胞因子,具有调控生物体的能量稳态、葡萄糖代谢和脂肪代谢等功能。它的降低脂肪沉积效应、减重效应与对胰岛素的增敏效应使其在机体中发挥调控能量分配的作用;抗炎、抗血管损伤功能则可能为治疗相关的动物疾病提供新的靶点。本文介绍了脂联素的来源、分子结构、生物学功能及影响其分泌的因素,阐述了脂联素对动物脂肪沉积的影响,展望了脂联素在养猪生产中的应用前景。毕赤酵母(Pichia pastoris)蛋白表达系统是近些年来发展起来的一种真核表达系统,与其他表达系统相比,该系统所具有的诸多优势使其研究价值和应用价值越来越广泛,已经成功表达了多种蛋白质。在本研究中我们希望在毕赤酵母GS115中高效表达出有活性的重组脂联素。本研究实验部分分为沙子岭猪脂联素基因克隆章节和沙子岭猪脂联素基因在毕赤酵母中的表达章节。在实验一中,从沙子岭猪脂肪组织中提取总RNA,利用设计的一对特异性引物ADPN-P1和ADPN-P2,采用RT-PCR的方法获得猪脂联素基因编码序列cDNA-ADPN;构建重组克隆质粒pMD-ADPN,挑取阳性克隆进行测序。测序结果显示沙子岭猪脂联素基因大小为732bp,共编码244个氨基酸,在NCBI上进行BLAST比较,发现结果与基因库中公布的猪脂联素基因序列同源性为100%。这充分证明本章实验成功的克隆了沙子岭猪脂联素基因。在实验二中,将成功克隆的脂联素基因整合入酵母表达载体pPICZaA,构建沙子岭猪脂联素基因酵母重组表达载体pPICZaA-ADPN;以电转化的方法将重组表达载体转化到毕赤酵母GS115中,构建沙子岭猪脂联素基因重组酵母表达菌GS115-ADPN;用甲醇诱导培养,目的蛋白被分泌表达到培养液中,收集目的蛋白进行Western Blot鉴定,结果显示脂联素在GS115菌株中得到了正确分泌表达,并具备一定的免疫活性;用Bradford法测得本研究构建的GS115-ADPN对脂联素蛋白表达的水平为28.5μ g/mL