生物絮凝剂作为一种新型絮凝剂,其优点在于安全无毒、絮凝活性高和无二次污染等,因此在实际应用中对人类健康和环境保护具有重要意义。本课题在前期研究中,已经成功分离得到具有高效絮凝能力的1株低温茵Pseudomonas sp.HD8,本论文主要对该菌产絮凝剂的影响因素进行分析,并进一步分离纯化絮凝剂并对其絮凝机制进行研究,为生物絮凝剂产品开发和制备提供研究基础。在分析菌株的絮凝影响因素方面,主要通过单因素法对碳源、氮源、中间产物和温度等因素进行考察,结果表明,以葡萄糖为碳源、酵母膏+蛋白胨为氮源,在20℃培养24h,絮凝菌生长和絮凝效果最好,絮凝率高达92%;在温度低至5℃时,菌株H8仍具有较高絮凝活性,絮凝率为87%;添加糖代谢中间产物实验结果表明絮凝菌H8的合成代谢途径中存在着酵解和TCA循环。利用乙醇沉淀法结合超高速离心法从菌株H8发酵液中分离提取絮凝剂粗制品,产量0.56g/L,测得其化学成分91.3%是多糖,蛋白质含量占2.98%。采用sevage法对絮凝剂粗制品进行脱蛋白试验,结果证明絮凝有效成分为多糖。然后通过Sephadex G-100和SepharoseCL-4B两种凝胶层析柱进一步纯化絮凝剂,得到的纯品H8-2浓缩后冷冻干燥,得到白色片状松散固体,轻压即成粉末,絮凝率高达96.8%。凝胶色谱法测得絮凝剂纯品H8-2的相对分子质量为4.8×106Da;红外光谱仪检测絮凝剂的分子结构中包含活性基团分别为-OH、-COOH、-NH2以及-P03等;高效液相色谱法检测组成絮凝剂多糖的单糖主要有甘露糖、葡萄糖醛酸以及葡萄糖;絮凝性质研究结果表明,在絮凝剂的投加量为0.1g/L,絮凝率最高为98.3%;最适合温度30～40℃,但在低温5℃和高温100℃时,仍然保持80%和60%以上的絮凝活性,pH<7范围内,絮凝效果都能达到80%,碱性条件下,絮凝效果明显下降;Zeta电位分析以及粒度分析都证明絮凝过程中以吸附架桥作用为主,同时钙离子起到电中和作用;结合键类型分析表明高岭土颗粒与絮凝剂之间是通过离子键连接的而非氢键;从扫描电镜照片可观察到絮凝剂絮凝过程中卷扫机理的存在。分析结果初步认为絮凝剂H8的絮凝机制中吸附架桥作用为主,但同时还存在其它的絮凝作用力,可能是电中和作用和卷扫作用的共同结果。