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研究背景及目的:脑胶质瘤(glioma)是中枢神经系统常见的原发性肿瘤,具有恶性程度高、治疗困难、预后差、频繁复发等特点。胶质瘤的标准治疗方法是以手术切除肿瘤,同时结合放疗、化疗等辅助治疗的综合治疗方法。虽然胶质瘤的诊疗技术不断的进步与发展,但目前胶质瘤的治疗现状仍不乐观。胶质瘤细胞具有高度的迁移和侵袭能力,常造成肿瘤细胞的广泛侵袭,给胶质瘤的治疗带来极大的困难。因此探讨导致胶质瘤细胞高迁移和高侵袭特性的分子机制,并研究相应的靶向药物,已成为当前胶质瘤治疗中亟待解决的问题。近来的大量研究证据表明,上皮间质转化(EMT)与肿瘤的侵袭、转移、进展有密切联系,EMT是肿瘤侵袭与转移中的关键生物学过程,肿瘤细胞发生EMT会导致肿瘤细胞迁移和侵袭能力的增加。而且,EMT还与肿瘤干细胞(CSCs)紧密联系,而CSCs也是肿瘤发生侵袭、转移、耐药、复发的重要原因,因此如能找到靶向胶质瘤EMT的方法,不仅可以抑制胶质瘤EMT,而且还可以调控胶质瘤的干细胞性质,这无疑会给胶质瘤的治疗带来新的突破。二甲双胍是一种被广泛应用的降糖药物,白藜芦醇是一种天然的多酚类化合物。近年来研究发现,二甲双胍和白藜芦醇不仅可以发挥抗肿瘤效果,更重要的是可以调控肿瘤细胞的EMT过程。但这两种药物对胶质瘤EMT过程的抑制作用,尚未见系统研究过。本研究旨在研究胶质瘤细胞发生EMT改变以及二甲双胍和白藜芦醇对胶质瘤EMT改变的抑制作用及分子机制。方法:在本研究中,我们利用TGF-β1诱导胶质瘤细胞发生EMT改变,观察EMT对胶质瘤细胞生物学性能的影响,应用二甲双胍和白藜芦醇作为胶质瘤EMT的干预药物。通过免疫印迹、划痕试验、Transwell侵袭试验、肿瘤球形成试验等方法,分析和研究二甲双胍和白藜芦醇对胶质瘤发生EMT的抑制作用以及对EMT获得的肿瘤干细胞性能的调控作用,并探讨可能的作用机制。结果:1.TGF-β1可以诱导胶质瘤细胞发生上皮间质标志物的转变,使细胞形态变得拉长、伸长,增加胶质瘤细胞的迁移和侵袭能力,表明TGF-β1可以诱导胶质瘤细胞发生EMT改变,并建立诱导胶质瘤EMT改变的模型。2.干扰转录因子ZEB1在胶质瘤的表达,可抑制胶质瘤细胞上皮间质标志物的转变,并抑制胶质瘤细胞的迁移和侵袭,从而抑制胶质瘤细胞发生EMT。3.胶质瘤细胞发生EMT能增加胶质瘤的自我更新能力、上调肿瘤干细胞标志物的表达,表明EMT可使胶质瘤细胞获得肿瘤干细胞的性质。4.二甲双胍和白藜芦醇可以抑制胶质瘤细胞上皮间质标志物的表达,并抑制胶质瘤细胞的迁移和侵袭能力,表明二甲双胍和白藜芦醇能抑制胶质瘤发生EMT改变。5.二甲双胍和白藜芦醇分别通过抑制AKT/m TOR通路和Smad依赖通路抑制胶质瘤EMT改变。6.二甲双胍和白藜芦醇能有效抑制胶质瘤EMT获得的细胞自我更新能力和干细胞标志物的表达,表明它们能抑制胶质瘤EMT获得的肿瘤干细胞性质。结论:1.证明胶质瘤LN18和U87细胞在一定条件下能发生EMT。2.ZEB1在胶质瘤细胞EMT发生中起关键调控作用。3.胶质瘤细胞发生EMT可使胶质瘤细胞获得肿瘤干细胞性质。4.二甲双胍和白藜芦醇能抑制胶质瘤细胞EMT改变、抑制细胞的迁移和侵袭。5.二甲双胍和白藜芦醇分别通过抑制AKT/m TOR通路和Smad依赖通路抑制胶质瘤细胞EMT 6.二甲双胍和白藜芦醇能抑制胶质瘤EMT获得的肿瘤干细胞性质。