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狂犬病是由狂犬病病毒引起的急性烈性人兽共患传染病,流行性广,病死率高,一旦发病几乎100%死亡,疫苗接种是防控和消灭狂犬病的唯一方法。人用狂犬病疫苗多用于暴露后预防,因此疫苗的有效性至关重要,而在疫苗制备中,毒种是生产出安全有效疫苗最为重要的因素。aGV疫苗株系aG株经Vero细胞传代适应,药典规定不超过15代,均为各企业自主传代适应,我国目前已批准用于Vero细胞人用狂犬病疫苗的生产。然而由于疫苗毒株在该细胞培养的生物学特性还缺乏系统研究,制约了疫苗质量的进一步提高。基于目前对狂犬病病毒及其特性的研究,本文将狂犬病毒固定毒3aG株在Vero细胞上适应传代,按照《中国药典》三部(2010版)要求建立毒种库,aGV9(主种子库)和aGV12(工作种子库),对其生物学特性进行了全面研究:aGV毒种在电镜下呈典型的子弹状,可见病毒包膜、刺突等结构;在Vero细胞上的病毒毒力逐代提高,第8~12代毒力达到并稳定在1~5×108FFU/ml;aGV9株与3aG株糖蛋白基因序列同源性为96.95%,氨基酸序列同源性为98.86%,主要抗原位点氨基酸序列没有发生变化,显示该毒种遗传稳定性良好。该病毒在Vero细胞上适应性良好,外周致病性降低,无外源因子污染;aGV9和aGV12的中和指数分别为5011和15848,显示该毒种具有较高的免疫原性。以该毒种进行了连续3个批次生物反应器工艺病毒培养,病毒收获液抗原含量高峰可达8~10IU/ml水平,经浓缩、纯化、冻干后制备成人用狂犬病疫苗,经全面检定,各项指标均符合《中国药典》三部(2010版)要求。以上结果表明,本研究适应的狂犬病病毒aGV株有望作为人用狂犬病疫苗株应用于生产,结合生物反应器病毒培养工艺,以期生产出安全、高效、经济的人用狂犬病疫苗,提高我国人用狂犬病疫苗的市场供应,缓解我国居高不下的狂犬病疫情。