论文部分内容阅读
母体氧化应激不利于胚胎、胎儿和胎盘的发育。胚胎发育过程中暴露于双酚A(Bisphenol A,BPA)将会造成组织氧化应激,而甲基供体的添加或许能够提高抗氧化能力改善机体氧化状态。本试验按2×2因子设计,试验处理效应来自两方面:甲基供体和双酚A。研究母猪妊娠期日粮添加甲基供体(Methyl donor,MET)对繁殖性能以及母体和后代抗氧化能力的影响,并在此基础上考察了甲基供体是否能抵消双酚A对母体和后代的作用。选择体重(221.14±2.57kg)、胎次接近的60头LY母猪,配种后随机分为4个组(n=15),妊娠期各组日粮组成如下:1)CON组,基础日粮;完全满足NRC(2012)推荐的妊娠母猪营养需求。2)BPA组,基础日粮+双酚A;3)MET组,基础日粮+甲基供体;4)MET+BPA组,基础日粮+甲基供体+双酚A。试验母猪从妊娠第一天开始供给相应试验日粮,直至分娩。分娩后所有母猪饲喂同一泌乳期饲粮,28天断奶。采集血液、乳、绒毛尿囊膜和新生仔猪肝脏样品用于分析抗氧化相关指标以及抗氧化酶相关基因。试验结果表明
1、繁殖性能
母猪妊娠期添加甲基供体显著增加了断奶平均体重与断奶窝重(P<0.05),甲基供体组和双酚A组的仔猪初生重均显著高于对照组(P<0.05),MET+BPA组活产仔数、初生重与断奶平均体重均显著高于对照组(P<0.05)。
2、母猪血浆同型半胱氨酸水平
母猪妊娠期添加甲基供体显著影响了血浆中同型半胱氨酸(HCY)的浓度,在母猪妊娠35和110天甲基供体组HCY水平显著低于CON和BPA组(P<0.05)。
3、氧化状态相关指标
(1)在妊娠35天,与CON组和BPA组相比,甲基供体的添加显著提高了母猪血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.01);在妊娠110天,MET组与BPA组相比显著降低了丙二醛(MDA)浓度;与BPA和BPA+MET组相比,在分娩0天MET的添加显著提高了血浆中总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05)。与MET组和CON组相比,BPA的添加显著降低了妊娠35天血浆中过氧化氢酶(CAT)活性及分娩0天T-AOC(P<0.01);在母猪妊娠110天,BPA的添加显著提高了血浆中MDA浓度(P<0.01)。
(2)母猪妊娠期MET的添加显著提高了常乳中SOD的活性(P<0.01);与对照组和BPA组相比,MET的添加显著提高初乳和常乳中T-AOC(P<0.01),有提高初乳中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的趋势(P=0.06)。而母猪妊娠期BPA的暴露显著增加了常乳中MDA浓度(P<0.05)。
(3)与BPA组相比,母猪妊娠期MET的添加显著提高了脐带血SOD活性(P=0.01);与CON组和BPA组相比,MET的添加显著提高了脐带血CAT的活性(P<0.01)。妊娠期BPA的添加显著降低了脐带血血浆SOD活性(P<0.01);与MET组相比,BPA的添加显著降低了脐带血GSH-Px活性(P<0.05);与CON组和MET组相比,母猪妊娠期BPA的暴露显著降低了脐带血T-AOC(P<0.01)。
(4)母猪妊娠期MET的添加显著提高了新生仔猪血浆CAT和GSH-Px的活性(P<0.01);与CON组和BPA组对比,MET组显著提高了T-AOC浓度(P<0.01)。与MET组相比,BPA的添加显著降低了新生仔猪血浆CAT活性(P<0.01),同时显著提高了新生仔猪血浆MDA浓度(P=0.01)。
(5)与CON组和BPA组对比,母猪妊娠期MET的添加组显著提高了新生肝脏CAT和GSH-Px活性及T-AOC水平(P<0.01);与BPA组相比显著降低了MDA浓度(P<0.01)。母猪妊娠期BPA的添加显著提高了新生仔猪肝脏MDA浓度(p=0.05)。
(6)与CON组合BPA组对比,MET的添加显著提高了BPA+MET组绒毛膜尿囊SOD的活性(P<0.01);与BPA组对比,MET的添加显著提高了绒毛膜尿囊CAT活性(P<0.05);与CON组和BPA组对比,MET组显著提高了绒毛膜尿囊GSH-Px和ASA的活性。与CON和MET组相比,BPA的添加显著提高了绒毛膜尿囊中MDA的浓度(P<0.01)。
(7)母猪妊娠期甲基供体添加显著影响了绒毛膜尿囊Cu,Zn-SOD(铜,锌超氧化物歧化酶)和GPx1(谷胱甘肽过氧化物酶1)基因表达。与CON组相比,甲基供体组显著上调了Cu,Zn-SOD mRNA的表达(P<0.01);与CON和BPA组相比,母猪妊娠期MET的添加显著上调了GPx1mRNA的表达(P<0.05)。
新生仔猪肝脏Cu,Zn-SOD基因的表达显著受到母猪妊娠期BPA添加的影响,GPx1和CAT基因表达显著受到MET的影响。与MET组相比,BPA的添加显著降低了Cu,Zn-SOD的表达(P=0.01)。母猪妊娠期甲基供体的添加显著上调了新生仔猪肝脏Mn-SOD(锰-超氧化物歧化酶)的表达(P<0.01)。
综上所述:母猪妊娠期暴露于双酚A诱导了母体、脐带血和新生仔猪的氧化应激;而妊娠期甲基供体的添加降低了母猪血浆HCY浓度,增强了母体、胎盘和后代的抗氧化能力,逆转了BPA导致的氧化应激。
1、繁殖性能
母猪妊娠期添加甲基供体显著增加了断奶平均体重与断奶窝重(P<0.05),甲基供体组和双酚A组的仔猪初生重均显著高于对照组(P<0.05),MET+BPA组活产仔数、初生重与断奶平均体重均显著高于对照组(P<0.05)。
2、母猪血浆同型半胱氨酸水平
母猪妊娠期添加甲基供体显著影响了血浆中同型半胱氨酸(HCY)的浓度,在母猪妊娠35和110天甲基供体组HCY水平显著低于CON和BPA组(P<0.05)。
3、氧化状态相关指标
(1)在妊娠35天,与CON组和BPA组相比,甲基供体的添加显著提高了母猪血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性(P<0.01);在妊娠110天,MET组与BPA组相比显著降低了丙二醛(MDA)浓度;与BPA和BPA+MET组相比,在分娩0天MET的添加显著提高了血浆中总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05)。与MET组和CON组相比,BPA的添加显著降低了妊娠35天血浆中过氧化氢酶(CAT)活性及分娩0天T-AOC(P<0.01);在母猪妊娠110天,BPA的添加显著提高了血浆中MDA浓度(P<0.01)。
(2)母猪妊娠期MET的添加显著提高了常乳中SOD的活性(P<0.01);与对照组和BPA组相比,MET的添加显著提高初乳和常乳中T-AOC(P<0.01),有提高初乳中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的趋势(P=0.06)。而母猪妊娠期BPA的暴露显著增加了常乳中MDA浓度(P<0.05)。
(3)与BPA组相比,母猪妊娠期MET的添加显著提高了脐带血SOD活性(P=0.01);与CON组和BPA组相比,MET的添加显著提高了脐带血CAT的活性(P<0.01)。妊娠期BPA的添加显著降低了脐带血血浆SOD活性(P<0.01);与MET组相比,BPA的添加显著降低了脐带血GSH-Px活性(P<0.05);与CON组和MET组相比,母猪妊娠期BPA的暴露显著降低了脐带血T-AOC(P<0.01)。
(4)母猪妊娠期MET的添加显著提高了新生仔猪血浆CAT和GSH-Px的活性(P<0.01);与CON组和BPA组对比,MET组显著提高了T-AOC浓度(P<0.01)。与MET组相比,BPA的添加显著降低了新生仔猪血浆CAT活性(P<0.01),同时显著提高了新生仔猪血浆MDA浓度(P=0.01)。
(5)与CON组和BPA组对比,母猪妊娠期MET的添加组显著提高了新生肝脏CAT和GSH-Px活性及T-AOC水平(P<0.01);与BPA组相比显著降低了MDA浓度(P<0.01)。母猪妊娠期BPA的添加显著提高了新生仔猪肝脏MDA浓度(p=0.05)。
(6)与CON组合BPA组对比,MET的添加显著提高了BPA+MET组绒毛膜尿囊SOD的活性(P<0.01);与BPA组对比,MET的添加显著提高了绒毛膜尿囊CAT活性(P<0.05);与CON组和BPA组对比,MET组显著提高了绒毛膜尿囊GSH-Px和ASA的活性。与CON和MET组相比,BPA的添加显著提高了绒毛膜尿囊中MDA的浓度(P<0.01)。
(7)母猪妊娠期甲基供体添加显著影响了绒毛膜尿囊Cu,Zn-SOD(铜,锌超氧化物歧化酶)和GPx1(谷胱甘肽过氧化物酶1)基因表达。与CON组相比,甲基供体组显著上调了Cu,Zn-SOD mRNA的表达(P<0.01);与CON和BPA组相比,母猪妊娠期MET的添加显著上调了GPx1mRNA的表达(P<0.05)。
新生仔猪肝脏Cu,Zn-SOD基因的表达显著受到母猪妊娠期BPA添加的影响,GPx1和CAT基因表达显著受到MET的影响。与MET组相比,BPA的添加显著降低了Cu,Zn-SOD的表达(P=0.01)。母猪妊娠期甲基供体的添加显著上调了新生仔猪肝脏Mn-SOD(锰-超氧化物歧化酶)的表达(P<0.01)。
综上所述:母猪妊娠期暴露于双酚A诱导了母体、脐带血和新生仔猪的氧化应激;而妊娠期甲基供体的添加降低了母猪血浆HCY浓度,增强了母体、胎盘和后代的抗氧化能力,逆转了BPA导致的氧化应激。