随着生活水平和医疗科技的发展以及人类平均寿命的延长,我国已经开始步入老龄化社会。衰老是许多慢性疾病的首要危险因素,繁重的发病率给老年人的生活带来了极大的痛苦,同时给家庭和社会造成沉重的负担。在整体水平上,衰老表现为机体各个器官功能的逐渐衰退,激素调控水平的下降,各器官出现退行性疾病,如白内障,骨质疏松,糖尿病,心血管疾病,神经退行性疾病和肿瘤等。衰老细胞的积累被认为是导致机体衰老的重要元凶之一。衰老细胞不仅在机体内积累,还能通过自分泌和旁分泌的方式分泌衰老相关分泌表型（senescence-associated secretory phenotype,SASP）进一步导致周围细胞、组织的衰老,最终导致个体衰老和老年疾病的发生。针对衰老细胞的研究发现,通过向年轻小鼠体内注射衰老细胞,会诱发年轻小鼠的衰老以及衰老相关疾病的发生。另一项研究发现,通过转基因的方法清除衰老小鼠体内的衰老细胞可以延长小鼠寿命、降低衰老相关疾病的发生。因此,靶向清除衰老细胞可能成为抗衰老的新靶点。目前在药理学方面,具有代表性的靶向衰老细胞的化合物有:达沙替尼+槲皮素、ABT263可以清除衰老细胞;JAK抑制剂鲁索替尼可以抑制衰老细胞SASP的分泌。但是达沙替尼会引起肺水肿;ABT263会引起短暂性血小板和中性粒细胞减少症;鲁索替尼作为抗癌药,长期服用会引起血小板、红细胞或白细胞的减少因此开发和研究既安全又能够有效地清除衰老细胞的化合物显得尤为重要。清除衰老细胞和抑制SASP分泌需要从整体上针对衰老细胞的不同特性进行多靶点、多途径的干预。素以整体观念,辩证论治为指导的中医药,因其具有药效持久,多靶点活性以及毒副作用少等特点和优势而备受关注。因此,我们首先利用DNA损伤剂—依托泊苷处理人胚肺成纤维细胞W2构建DNA损伤诱导的衰老细胞模型。在此基础上,采用MTT法筛选多种具有抗衰老活性的中药小分子化合物对衰老细胞的清除作用。结果显示中药黄芪中的单体成分环黄芪醇（cycloastragenol,CAG）处理衰老W2后,衰老细胞数目减少达到80%以上,且对非衰老细胞无明显作用,提示CAG对衰老W2细胞具有选择性清除作用。为了进一步验证CAG对衰老细胞的清除作用,我们利用标记β-半乳糖苷酶的探针C12FDG标记衰老细胞后采用流式细胞仪检测衰老细胞数量,结果显示CAG处理组的衰老细胞数目显著减少,进一步验证了CAG对衰老细胞的清除作用。因此,CAG可能成为较安全的“senolytics”。我们通过显微镜看到CAG处理衰老W2细胞后出现了大量死亡,为了研究这一现象是否与细胞凋亡有关。我们运用Annexin V/PI双染色法检测CAG对衰老W2凋亡的影响。结果显示,与对照组相比,CAG处理组衰老细胞凋亡比例增加了30%以上。同时,我们凋亡相关蛋白的检测显示Bax/Bcl2比例明显升高,PARP出现明显切割带,进一步证明了CAG促进了衰老W2细胞的凋亡。另外,对促存活通路PI3K/Akt/mTOR的检测发现,CAG处理后,发现p-PI3K、p-Akt、p-mTOR表达降低,说明PI3K/Akt/mTOR信号通路也参与了CAG对衰老W2细胞的清除。我们通过Real-time PCR的方法研究CAG处理后的衰老W2细胞中SASP的表达,结果显示CAG降低了IL6,IL10,IL1β,CXCL5,CXCL10,IGBP7的m RNA表达。同时CAG抑制了与SASP表达相关的几个关键蛋白JAK2/STAT3,p38MAPK/NF-κB的表达,说明CAG抑制SASP的表达可能与JAK2/STAT3,p38MAPK/NF-κB有关。综上所述,CAG可能通过抑制抗凋亡蛋白Bcl2的表达、下调促存活通路PI3K/AKT/mTOR促进衰老细胞凋亡进而清除衰老细胞,同时下调JAK/STAT3、p38MAPK/NF-κB通路抑制SASP表达。