【摘 要】
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目的:通过建立胶原诱导关节炎(Collagen induced arthritis,CIA)小鼠模型,探讨黑骨藤皂苷(Periploca forrestii saponins,PFS)对胶原诱导关节炎小鼠模型抗炎及骨侵蚀机理的影响。方法:以胶原诱导的BLAB/c雌性小鼠胶原诱导关节炎为研究对象,随机分成3组,分别为正常组、CIA模型组及黑骨藤皂苷(PFS)组。对各组动物分别进行如下检测:免疫前及免
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目的:通过建立胶原诱导关节炎(Collagen induced arthritis,CIA)小鼠模型,探讨黑骨藤皂苷(Periploca forrestii saponins,PFS)对胶原诱导关节炎小鼠模型抗炎及骨侵蚀机理的影响。方法:以胶原诱导的BLAB/c雌性小鼠胶原诱导关节炎为研究对象,随机分成3组,分别为正常组、CIA模型组及黑骨藤皂苷(PFS)组。对各组动物分别进行如下检测:免疫前及免疫后每间隔4 d测量一次小鼠踝关节体积;对踝关节拍照,进行临床症状评分;取踝关节作切片,观察踝关节病理变化;采用免疫组化法,检测p-p65、MMP-9在滑膜组织中的表达;采用Western blotting法,检测相关蛋白的表达;采用ELISA法,检测血清中CII相关抗体及组织中MCP-1的含量。结果:测量踝关节及关节炎症状评分结果表明,PFS可减轻CIA模型踝关节肿胀程度及关节症状评分(F=67.181,P<0.05)。HE染色及病理学评分结果表明:PFS可抑制CIA模型踝关节滑膜增生、炎细胞浸润(F=424.427,P<0.001)。甲苯胺蓝染色及病理学评分结果表明:PFS可减轻CIA模型踝关节软骨破坏(F=211.861,P<0.001)。TRAP染色及计数结果表明:PFS可抑制破骨细胞的浸润,有阻止踝关节软骨及骨的损坏作用(F=12.041,P<0.05)。免疫组化结果表明:PFS可抑制CIA模型滑膜组织中p-p65、MMP-9阳性细胞的表达水平(F=129.716、38.183,P<0.001)。Western blotting结果表明:PFS可抑制蛋白IκB(F=83.328,P<0.01)、p-IκB(F=44.737,P<0.05)、p-p65、MMP-9(F=8.794,P<0.05)、c-fos(F=93.899,P<0.01)、cathepsin K的表达水平。ELISA结果显示:PFS可降低CIA模型血清中Ig G、Ig G2a(P<0.05)的表达水平,升高Ig G1(P<0.01)、Ig M的含量;PFS可降低CIA模型踝组织中MCP-1表达水平(F=83.328,P<0.05)。结论:PFS有抑制CIA模型关节肿胀程度及软骨的损害的作用,其机制可能是PFS阻断了NF-κB信号通路,表现为组织中相关蛋白IκB、p-IκB、p-p65、MMP-9、c-fos、cathepsin K、MCP-1水平减低及影响相关抗体的表达水平。
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