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目的: 利用RNA干扰（RNA interference，RNAi）技术抑制髓母细胞瘤细胞中Metadherin（MTDH）基因的表达水平，来观察和分析该基因对人髓母细胞瘤Daoy细胞上皮-间质转化（epithelial-mesenehymal transition，EMT）的影响，初步探讨MTDH基因在髓母细胞瘤转移中的作用。 方法: 首先设计、合成MTDH基因的小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)序列（MTDH siRNA)和阴性对照siRNA序列，进而构建相应的表达质粒，在E.coli菌株中进行扩增培养，分别提纯质粒。将本实验室购买的髓母细胞瘤细胞株Daoy细胞培养于含10％FBS的DMEM培养基中，当细胞增殖到一定数量，将细胞消化后接种于6孔板，每孔含5×105个细胞，过夜培养。实验共分为三组:MTDH siRNA组、阴性对照siRNA组和普通Daoy细胞组。待生长至30%-50％密度，MTDH siRNA组、阴性对照siRNA组细胞分别取MTDH siRNA质粒和阴性对照siRNA质粒与Lipofectamine2000试剂进行转染；普通Daoy细胞组仅加转染试剂Lipofctamine2000。随后观察细胞的生长状况，绘制细胞生长曲线来评价 MTDH对肿瘤细胞增殖、生长特性的影响，并用TUNEL染色荧光显微镜下观察肿瘤细胞的凋亡情况。采用细胞划痕实验检测MTDH干扰后对肿瘤细胞侵袭能力的影响。分别收集三组细胞，提取总RNA和蛋白质，通过RT-PCR检测MTDH目的基因水平，以及细胞中上皮细胞标记基因和间质细胞标记基因水平的变化，包括E-Cadherin（CDH1）、vimentin（VIM）等；通过Western-Blot法检测MTDH蛋白、CDH1蛋白、VIM蛋白的表达水平。 结果: 成功设计合成髓母细胞瘤株Daoy细胞MTDH的小干扰RNA(MTDH siRNA)序列，并构建相应的表达质粒。RT-PCR实验结果显示，与阴性对照siRNA细胞组和普通Daoy细胞组相比，MTDH siRNA组细胞MTDH mRNA的表达和VIM mRNA表达显著减少（P<0.05），CDH1 mRNA表达增高（P<0.05）。Western blot印迹实验表明，MTDH siRNA组与阴性对照siRNA组和普通Daoy细胞组比较，细胞中MTDH蛋白和VIM蛋白印的印迹减弱，CDH1蛋白印迹升高。MTDH siRNA质粒组与阴性对照siRNA组和普通Daoy细胞组相比，细胞生长增殖受到一定程度的抑制，细胞划痕实验阳性，证明干扰MTDH mRNA的表达后可抑制髓母细胞瘤的生长，迁移，有效促进其凋亡。阴性对照siRNA组和普通Daoy细胞组间MTDH、VIM、CDH1蛋白的表达均无显著差异（P>0.05），细胞生长增殖没有受到影响，细胞划痕实验阴性，肿瘤细胞的转移运动能力未受到影响。 结论: MTDH siRNA质粒和阴性对照siRNA质粒成功转染入人髓母细胞瘤Daoy细胞株，并有效的抑制了MTDH基因的表达。 沉默MTDH基因后髓母细胞瘤Daoy细胞株中CDH1表达升高，VIM蛋白表达亦降低，有效的抑制了细胞的上皮间质转化（EMT）过程。 MTDH基因的高表达可能是肿瘤发生侵袭转移的重要分子标志。RNA干扰方法有望成为解决髓母细胞瘤抗浸润转移治疗的新途径之一。