【摘 要】
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辽东楤木(Aralia elata),是药食同源性植物,含有皂苷、黄酮、多糖等活性成分,具有极其丰富的药理作用,研究证明皂苷类化合物是辽东楤木中主要的生物活性成分。本文以辽东楤木的嫩芽为原料,对辽东楤木总皂苷的提取工艺、纯化工艺进行优化,采用液质联用技术对辽东楤木总皂苷组成进行分析,在此基础上研究辽东楤木总皂苷的稳定性、抗氧化活性及对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,为辽东楤木更好的开发利用,加快深加工利
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辽东楤木(Aralia elata),是药食同源性植物,含有皂苷、黄酮、多糖等活性成分,具有极其丰富的药理作用,研究证明皂苷类化合物是辽东楤木中主要的生物活性成分。本文以辽东楤木的嫩芽为原料,对辽东楤木总皂苷的提取工艺、纯化工艺进行优化,采用液质联用技术对辽东楤木总皂苷组成进行分析,在此基础上研究辽东楤木总皂苷的稳定性、抗氧化活性及对α-葡萄糖苷酶的抑制活性,为辽东楤木更好的开发利用,加快深加工利用步伐提供科学的理论参考。主要的研究结果如下:1.采用响应面法分别对超声波法、超声波辅助双水相法提取辽东楤木总皂苷的工艺参数进行优化,最终通过比较两种提取方法的提取率和体外抗氧化活性,确定最佳提取工艺。超声波提取法工艺条件为:乙醇浓度71.00%、料液比1:72(g/m L)、超声时间40 min,在此工艺下,总皂苷提取率为36.51 mg/g,所得提取液对DPPH自由基和ABTS自由基清除率分别为72.97%和71.71%。超声波辅助双水相提取法工艺条件:硫酸铵浓度为24%、乙醇浓度为22%、超声时间为30 min,在此工艺下,总皂苷提取率为36.27 mg/g,提取液对DPPH自由基和ABTS自由基清除率分别为83.33%和81.51%。结果表明两种提取方式下总皂苷提取率相近,但用超声波辅助双水相法所得提取液抗氧化活性要强于超声波提取法,本文选择超声波辅助双水相法提取辽东楤木总皂苷用于纯化制备实验。2.采用大孔树脂法纯化辽东楤木总皂苷,通过单因素试验确定上样液浓度、上样量和洗脱方式。其中,上样浓度为0.25 mg/m L,上样体积为10 BV,皂苷吸附率为92.87%,以水和30%乙醇除杂后,收集70%乙醇洗脱液,得到辽东楤木皂苷纯化液,纯化后总皂苷含量为63.23%。通过测定辽东楤木总皂苷在不同条件下含量的变化,分别研究了温度、p H、光照对辽东楤木总皂苷稳定性的影响。结果表明:温度对辽东楤木总皂苷含量影响不大;强酸强碱对总皂苷含量有破坏作用;在避免室外阳光照射的条件下,辽东楤木总皂苷更稳定。采用液质联用技术对纯化后的辽东楤木总皂苷组成进行分离鉴定,共鉴定出3个化合物,分别为楤木皂苷A、楤木皂苷V和楤木皂苷Ⅱ。3.以PNPG为底物测定纯化后辽东楤木总皂苷和阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的抑制试验。辽东楤木总皂苷的IC50值为0.391 mg/m L,阿卡波糖IC50值为0.041 mg/m L。当浓度为2 mg/m L时,辽东楤木总皂苷对α-葡萄糖苷酶的抑制率为96.71%,阿卡波糖为87.65%。通过研究辽东楤木总皂苷和阿卡波糖对α-葡萄糖苷酶的酶促动力学,研究表明前者为非竞争性抑制,后者则为竞争性抑制。通过测定DPPH、ABTS自由基清除率来评价辽东楤木总皂苷的抗氧化活性。结果表明:当辽东楤木皂苷浓度为1.6 mg/m L时,对DPPH自由基的清除率可达到93.33%,对ABTS自由基的清除率可达到92.26%。
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