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蜂胶(propolis)是蜜蜂从植物的树芽、树皮等部位采集的树脂,再混以蜜蜂舌腺、蜡腺等腺体的分泌物,经蜜蜂加工转化而成的一种胶状物质。现在已经在蜂胶中发现了包括苯甲酸类、黄酮类、肉桂酸及其衍生物类等200多种化学成分。蜂胶具有消炎、抑菌、抗病毒、免疫调节和抗氧化等生物活性。本文研究了来自中国不同地区26种蜂胶水提物(Water extraction of porpolis, WEP)的化学成分、抗氧化活性和抑菌活性,并进行样品间差异性比较。建立了WEP抗氧化活性同其化学成分之间的数学模型,为中国蜂胶的进一步开发提供理论依据。具体结论如下:1、采用改进的蜂胶水提取方法,得到中国WEP,平均得率为6.0±1.6%。利用分光光度计对中国不同WEP理化性质及其主要成分进行了分析。结果表明,可溶性糖和总酚在WEP中含量最多,为WEP主要化学成分。各WEP的理化指标存在显著差异,浅色蜂胶的WEP中化学成分的含量要高于深色蜂胶;来自热带和亚热带地区蜂胶的WEP多数有效成分含量显著低于其他地区,而其他地区间WEP中有效成分差异不大。2、建立了同时测定WEP中23种多酚类化合物的反相高效液相色谱(RP-HPLC)分析方法。色谱柱:ZORBAX Eclipse XDB C18色谱柱(4.6mm×150 mm×5μm);流动相:甲醇-0.1%甲酸,梯度洗脱,流速1.0ml/min,检测波长:256 nm和280nm,进样量20μL,柱温35℃。所用的分离条件可以使两组混合对照品及WEP均实现良好分离。各对照品质量浓度与色谱峰面积线性关系良好;各对照品峰面积精确度的相对标准偏差(RSD)小于2.11%,重复性RSD小于4.33%,加样回收率在93.29%-106.61%。利用建立的HPLC方法,对26种WEP的化学组成进行了研究。不同WEP所含对照品种类和含量有很大的差异,表儿茶素、p-香豆酸、桑黄素、3,4-二甲氨基肉桂酸、柚皮素、阿魏酸、肉桂酸、生松素和白杨素8种对照品是中国WEP所共有的,可以认为是中国WEP的基本化学成分。所有WEP的HPLC色谱图中,以云南西双版纳蜂胶的图谱最为特殊,明显有别于其他图谱。3、用普鲁士兰法和清除DPPH自由基活性法对26种WEP的抗氧化能力进行评价。结果表明,中国大部分地区WEP具有较好的抗氧化活性,可以作为一种天然抗氧化剂。黄色蜂胶的水提取物总抗氧化活性和清除自由基能力要强于其他颜色WEP,热带WEP总抗氧化活性最低,其清除DPPH自‘由基能力也较弱;其它地区WEP的总抗氧化能力相当。通过对WEP抗氧化活性与化学组成相关性分析表明,中国WEP的抗氧化和清除DPPH自由基能力与其所含总酚、黄酮-黄酮醇含量相关性极显著,说明WEP中总酚和黄酮-黄酮醇含量越高,其抗氧化活性越强。可以通过E1cm1%这一指标简便、快捷地了解中国WEP质量。4、通过琼脂扩散法对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌、产气、毛霉5种微生物进行了抑菌圈和最小抑菌浓度研究。结果表明,中国WEP具有一定的抑菌活性,5种微生物受抑制程度由大到小是金黄色葡萄球菌>大肠杆菌>产气杆菌>毛霉>变形杆菌。西双版纳蜂胶对受试菌均不表现抑制作用。革兰氏阳性菌对WEP的敏感性高于革兰氏阴性菌,同蜂胶醇提物抑菌实验结果相一致。5、对不同季节WEP化学成分和抗氧化性研究表明,季节因素对中国热带和温带WEP化学成分和抗氧化活性都有显著影响。山东和湖北两者化学成分和抗氧化性比较接近,但同热带的海南蜂胶差异很大。中国热带WEP抗氧化活性很弱。6、WEP化学组成和抗氧化活性之间的数学模型。Y总抗氧化=0.003XE1cm1%+0.003X总酚+0.092X黄酮-黄酮醇-0.281,YDPPH=0.002XE1%/1cm+0.003X总酚+0.068X黄酮-黄酮醇-0.011,从理论上证实了WEP生物活性与其化学组成之间存在相关性。总之,中国WEP含有总酚和总黄酮等化学成分,具有较好的抗氧化性和抑菌作用,其理化特性和生物活性存在一定的样品间差异性,且生物活性与总酚和黄酮-黄酮醇等化学成分含量之间存在关联性,季节对中国WEP化学成分和抗氧化活性有显著影响。以上研究表明开发利用我国WEP具有可行性和良好的前景。