两种不同粒径5-Fu脂质体制备方法的研究

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目的:通过对不同方法及条件下制备氟尿嘧啶脂质体的比较,探讨制备出不同粒径5-Fu脂质体的方法,为口腔颌面部恶性肿瘤靶动脉灌注5-Fu脂质体行原发灶及区域转移淋巴的局部化疗研究提供不同粒径的纳米载体药物。   方法:一方面采用pH梯度法结合逆向蒸发法制备氟尿嘧啶脂质体,即称取适量卵磷脂、胆固醇(4:1),溶于氯仿/乙醚混合液(1:2 V/V),置于500ml茄形瓶中。将5-Fu溶于0.3mol/L的柠檬酸缓冲溶液(PH=4.0)中,逐滴滴入茄形瓶,水浴超声,直至形成稳定的W/O型乳状液。于旋转蒸发仪上减压除去有机溶剂,在瓶壁上形成凝胶,继续旋蒸,直至凝胶脱落,得到均匀的脂质体混悬液。然后用1 mol/L的磷酸氢二钠溶液将pH调至7.0;以pH7.4磷酸盐缓冲溶液调至适当浓度定容至100ml,置55℃水浴保温15min,即得;另一方面采用pH梯度法-超声-逆向蒸发法制备氟尿嘧啶脂质体,即在前一种方法凝胶脱落中后加超声振荡。超滤-紫外分光光度计检测包封率,电镜扫描观察脂质体形态及检测脂质体粒径。   结果:pH梯度法结合逆向蒸发法制备出的脂质体平均粒径为178.7nm,包封为70.29±1.74%,pH梯度法-超声-逆向蒸发法制备出的脂质体平均粒径为91.8nm,包封率为81.19±1.66%。不同浓度的氟尿嘧啶对超滤离心管的透过率无影响,脂质体对氟尿嘧啶的回收率无影响,超滤离心-紫外分光光度计法能准确检测出氟尿嘧啶脂质体的包封率。电镜扫描能清晰观察到脂质体的形态,能准确测量出脂质体的粒径。   结论:超滤-紫外分光光度计法检测包封率既方便,又快捷,而且准确;电镜扫描能非常清晰的观察到脂质体的形态,也能很快并且比较准确的测出脂质体粒径;不同方法能制备出不同粒径的(178.7nm,91.8nm)氟尿嘧啶脂质体。为口腔颌面部恶性肿瘤靶动脉灌注5-Fu脂质体行原发灶及区域转移淋巴的局部化疗研究提供不同粒径的纳米载体药物。
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