人母乳菌群悉生小鼠模型的建立及其分子生态学研究

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母乳细菌被认为是婴儿肠道共生菌的重要来源,但是已有的研究只鉴定出有限的几种能够定植在婴儿肠道的母乳细菌,即Bifidobacterium,Staphylococcus,Lactobacillus和Escherichia/Shigella。本研究将一位年龄38岁的母亲在顺产两天后的母乳灌胃给10只无菌小鼠(germfree mouse),并用普通饲料喂养小鼠。基于16S rRNA基因的变性梯度凝胶电泳(DGGE)和Illumina测序的结果显示,母乳中丰度大于1%的细菌只有Staphylococcus(56.0%)和Streptococcus(37.4%),但悉生小鼠粪便中的丰度大于1%的细菌为Streptococcus(80.3±2.3%),Corynebacterium(10.0±2.6%),Staphylococcus(7.6±1.6%)和Propionibacterium(2.1±0.5%),而且已有研究表明这些细菌是剖腹产婴儿胎粪中的优势菌;典型的肠道厌氧菌Faecalibacterium,Prevotella,Roseburia,Ruminococcus和Bacteroides的丰度在母乳中为0.01%-1%,在小鼠粪便中为0.003%-0.01%。Bifidobacterium在母乳中的丰度低于Illumina测序的检测极限,但在小鼠粪便中的丰度为0.003%-0.01%。这些结果表明,人母乳菌群悉生小鼠模型可以被用于鉴定能够定植在婴儿肠道中的母乳细菌。利用微生物纯培养的方法,本研究从母乳和母乳菌群悉生小鼠的粪便中分离到13株不同的Staphylococcus菌株和4株不同的Streptococcus菌株。我们需要寻找动物模型,用于研究这些母乳细菌对宿主健康的影响。利用从一名肥胖儿童肠道中分离到的、丰度占优势的大肠杆菌(Escherichia coli)D80株,我们探究了秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)模型用于评估细菌对宿主健康的影响的可行性。尽管不影响C.elegans的繁殖能力,D80显著缩短了C.elegans的寿命,并且野生型C.elegans对D80菌苔表现出规避行为。此外,用抑制细菌叶酸合成的磺胺类药物Sulfamethoxazole(SMX)处理E.coli D80,不能延长C.elegans的寿命。这些结果表明,与儿童肥胖显著相关的大肠杆菌E.coli D80不利于宿主C.elegans的健康,并且它缩短线虫寿命的机制可能不是通过叶酸途径进行的;在后续的研究中,C.elegans可以用于研究母乳细菌对宿主健康的影响。
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