【摘 要】
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目的通过无血清培养法体外培养胰腺癌微球体细胞,验证其肿瘤干细胞的富集效果,检测EGFR和ADAM9在胰腺癌微球体细胞中的表达。方法运用无血清条件培养基,悬浮培养胰腺癌Panc-1
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目的通过无血清培养法体外培养胰腺癌微球体细胞,验证其肿瘤干细胞的富集效果,检测EGFR和ADAM9在胰腺癌微球体细胞中的表达。方法运用无血清条件培养基,悬浮培养胰腺癌Panc-1细胞,并连续传代培养。将培养好的微球体接种于含血清培养基及胶原底物培养条件下进行分化诱导。收集微球体细胞及分化细胞,流式细胞术检测侧亚群细胞(side population,SP)比例;Real-time PCR及Western blot检测EGFR和ADAM9 mRNA和蛋白的表达。结果成功培养出胰腺癌Panc-1细胞微球体,并能在体外连续传代;分化诱导后重新贴壁生长。微球体细胞和分化细胞中SP比例分别为(3.38±0.46)%和(1.41±0.32)% (P<0.05)。微球体细胞与分化细胞相比,EGFR及ADAM9 mRNA表达分别上调了约2.5和3.0倍(P<0.05);蛋白表达分别上调了约2.84倍和2.0倍(P<0.05)。结论微球体培养能富集胰腺癌干细胞,ADAM9可能通过EGFR信号通路在胰腺癌的发生发展中起重要作用,有望成为胰腺癌新的治疗靶点。
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