银杏外种皮银杏酚酸的分离提取及其抑菌活性的研究

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近年来,随着银杏产业的发展,我国银杏种植面积不断扩大。每年在银杏加工过程中,大量银杏外种皮被当作废弃物丢弃,这不但浪费了宝贵的资源,而且其中的银杏酚酸等有毒成分还会对银杏种植和加工地域造成了环境污染,成为目前亟需解决的问题。 本论文以此为出发点,根据对银杏外种皮主要成分的分析结果,探讨了利用银杏外种皮中的可发酵性成分发酵生产酒精、从银杏外种皮中提取银杏酚酸的工艺条件以及银杏酚酸的抑菌活性等问题,以达到充分利用资源、解决环境污染的目的。 银杏外种皮主要成分的分析结果表明:新鲜银杏外种皮中水分含量为65%左右,总糖含量约为15%,还原糖量约为12%,蛋白质含量约为2%,所含碳源、氮源比较丰富,可以满足微生物发酵的需要。将银杏外种皮制成水提液培养基和半固态培养基,接种活性干酵母发酵生产酒精,发酵40h酒精度可达7.8%,半固态发酵周期较长为70h左右,但也能达7%的较好水平。 根据银杏酚酸在紫外光激发下能产生荧光的性质,建立银杏酚酸的荧光分光光度检测法。以白果酸为标样,激发波长345nm、发射波长420nm测定银杏酚酸。线性回归方程y=2.5024x+0.4152,线性范围0.50~100.00μg/mL,相关系数r=0.9922,相对标准偏差2.6%,检出限0.114μg/mL。考察了pH和杂质组分对测定的影响。该法检测结果与高效液相荧光检测法基本一致。 建立了乙醇浸提、大孔树脂和硅胶柱层析分离纯化银杏外种皮中银杏酚酸的工艺路线。乙醇浸提溶液经大孔树脂LSA-21和硅胶柱层析所得银杏酚酸的含量分别大于60%和95%;对分离出纯化所得的银杏酚酸样品进行HPLC-MS检测,结果与已知文献一致,另有一种分子量为374的银杏酚酸的同分异构体未见相关报导。 抑菌实验表明,银杏外种皮酚酸类物质对产气杆菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、四联球菌等细菌的抑制作用较强,对酵母的抑菌效果不明显。银杏酚酸对产气杆菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、四联球菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别6.9g/mL、12.3μg/mL、60.2μg/mL、112.0μg/mL、和400μg/mL
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