基于量子点的电化学生物传感器检测肿瘤细胞及其标志物

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肿瘤是严重威胁人类健康疾病之一。肿瘤标志物在肿瘤的临床诊断中是不可或缺的。近几年来,在肿瘤细胞及其标志物的诊断领域出现了多种分析方法及检测传感器。为了研制便携检测仪器,世界范围内的科研工作者们在此方面做了大量工作。虽然这些方法有很多优点,但开发新型的、选择性和灵敏度较高的临床分析方法以满足现代医疗诊断和生物医学研究的需求仍是一项极具挑战性的工作。本文研制了一种基于CdS和PbS两种量子点的新型的电化学生物传感器,其中还包含了磁珠和聚苯乙烯微球以及适体DNA的使用,并且将此种传感器应用在了MCF一7肿瘤细胞及其标志物的分析检测当中。另外,芯片毛细管电泳是一种新型的微型全分析系统,它具有分离效率高、分析速度快、试剂消耗少等优点。电化学检测以其检出限低、线性范围宽、选择性好、设备简单、价格低廉而得到广泛的应用。我们在这篇文章中提出了一个快速高效分离低分子量DNA片段的方法。本论文的主要内容包括:利用连接DNA作为稳定剂合成了CdS和PbS纳米粒子,DNA的一端含巯基参加合成反应,另一端含有氨基,适体的氨基端与表面带有羧基的磁珠或是聚苯乙烯微球反应,通过控制两种:DNA的比例,大量的连接DNA和少量的适体接到表面带有羧基的磁珠或是聚苯乙烯微球表面以分别获得带有磁性的MUCl纳米探针和非磁性的HER一3纳米探针。在磁性MUCl纳米探针上的与金电极上的捕获DNA杂交适体,在靶细胞存在的条件下与细胞表面的MUCl结合。磁性分离后,靶细胞被转移到另外一种含有非磁性的HlER-3纳米探针的溶液中并确保细胞表面的HER一3可以-通过适体和蛋白的亲和性完全的跟纳米探针结合。然后,用HN03溶液溶解CdS和PbS纳米粒子,得以通过阳极溶出伏安法(ASV)进一步检测Cd2+和Pb2+。然后,目标细胞的数量和靶细胞表面的MUCl和HER.一3量可以通过Cd2+和Pb2+的信号推算得到。由于一个磁珠或是聚苯乙烯微球可以与数千个CdS和PbS纳米粒子结合,因此,信号就得以显著的提高。在芯片毛细管电泳中将金胶作为标记与酶增强电化学检测结合。这种方法首先将巯基DNA修饰到金胶表面,然后靶DNA以“三明治”夹心的方式分别与胶体金表面的DNA和HIRP标记的信号DNA亲和杂交,最后将反应混合物在芯片上进行电泳分离,在通道末端对HRP催化产物3一氨基吩嗪进行电化学检测,经过实验最终确定检测的最佳条件是:分离电压+1600 V,检测电位.0.5 V,进样电压+100 kV3 S,100 S之内完成检测。
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