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随着我国水产行业的蓬勃发展,集约化程度不断提高等因素造成病害频发,防治过程中使用抗生素带来效益的同时也引发了一系列的弊端,严重阻碍了水产养殖业可持续发展,危害人类健康和环境安全。由此,较多营养添加剂或非营养添加剂应运而生。三丁酸甘油酯(tributyrin,TB)作为一种短链脂肪酸酯,已作为饲料添加剂被广泛应用于畜禽中,但在水产动物中所起的作用及其机理鲜见报道。本文以异育银鲫(Carassius auratus gibelio)为研究对象,分别研究了不同含量的三丁酸甘油酯对异育银鲫生长性能、免疫功能、肠道组织结构及抗病力的影响,并运用高通量测序技术进一步研究三丁酸甘油酯作用下异育银鲫肠道转录组差异基因表达的影响,揭示了三丁酸甘油酯对异育银鲫促生长的作用机制。主要研究结果如下:1.三丁酸甘油酯对异育银鲫生长性能、肝功能和抗病力的影响本试验选择健康、体重相近(43.58±1.6)g的异育银鲫450尾,随机分为5组,每组3个重复,每个重复30尾。以基础饲料作为对照,分别在基础饲料中添加0.5g/kg、1 g/kg、1.5 g/kg、2 g/kg TB,配制成4种饲料进行试验。预备试期2周,正式试验期8周,试验结束后检测其生长性能和肝功能,并用嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)进行感染试验,检测96h内的相对保护率。结果表明,各试验组异育银鲫的增重率、特定生长率均高于对照组,且增重率和特定生长率随添加量的增加均呈现先上升后下降的趋势,其中添加1 g/kg TB效果最佳,显著降低了饵料系数(p<0.05);各试验组肝胰脏中的谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)与对照组相比均无显著性差异(p>0.05),试验组血清中GOT和GPT活性均比对照组低,且GOT与对照组相比差异显著(p<0.05);感染嗜水气单胞菌后,各试验组在96h内的相对保护率(RPS)分别为,26.08%、45.31%、56.65%、40.74%,在1.5g/kg TB时相对保护率最高。以上结果表明投喂8周添加了三丁酸甘油酯的饲料能够增强异育银鲫生长性能,提高转氨酶活性和抗嗜水气单胞菌感染的能力。2.三丁酸甘油酯对异育银鲫肠黏膜形态结构和免疫指标的影响养殖试验结束后,取出各组织并进行相应的测定。结果显示:当添加量为1g/kg时,肠黏膜绒毛高度显著增加,显著降低了隐窝深度,各试验组的绒腺比皆高于对照组,且各试验组肠道的肌层厚度除2g/kgTB组外,其他试验组均高于对照组(p<0.05);各试验组的头肾和脾脏指数在添加量为0.5~1.0 g/kg范围内显著高于对照组(p<0.05),当三丁酸甘油酯的添加量为1g/kg时,血清和肝胰脏中溶菌酶(LSZ)、酸性磷酸酶(ACP)、碱性磷酸酶(AKP)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活力得到了显著的提高,显著降低了一氧化氮(NO)和丙二醛(MDA)的含量。以上结果表明三丁酸甘油酯在一定程度上能够加快肠道对营养物质的消化吸收能力,增强机体代谢能力,促进肠道发育和修复,促进机体生长。3.三丁酸甘油酯对异育银鲫促生长机理的研究通过转录组测序的手段将1g/kgTB组的异育银鲫与对照组相比较,共获得2705个差异表达基因,其中上调表达基因522个,下调表达基因2183个。通过差异表达基因GO功能富集分析可知1g/kgTB组异育银鲫变化最大的是参与酰胺生物合成过程、有机氮化合物代谢过程中的大部分差异基因均表达上调。KEGG pathway通路中看出,除了影响物质代谢通路外,还会对mTOR信号通路造成影响。三丁酸甘油酯能够通过提高胰岛素样生长因子I和丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶来激活mTOR信号通路,从而提高鱼体对饲料中蛋白的利用率,促进肠道蛋白质合成及上皮细胞的生长;与此同时,胰岛素样生长因子I能够促进胰岛素的释放,结合胰腺腺泡细胞上的特异性受体后,加快脂肪酶和胰蛋白酶等酶的分泌,从而进一步加快对三丁酸甘油酯的分解利用,增强电解质和水的吸收利用,增强鱼体免疫功能,达到促生长的效果。