HIV/AIDS患者接受HAART第一年期间口腔表征及口腔念珠菌状态的动态监测

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目的:动态监测接受HAART第一年期间HIV/AIDS患者口腔表征、口腔念珠菌状态,以及外周血CD4+T淋巴细胞计数、CD4+/CD8+比值,探讨HIV/AIDS患者在HAART过程中口腔表征、口腔念珠菌负荷、生物分型、药物敏感性和免疫状况的动态变化以及相关关系。方法:本研究纳入从2011年9月至2014年1月期间在广西壮族自治区疾病预防控制中心艾滋病门诊确诊为HIV/AIDS患者并接受HAART的90例成人患者作为实验组。并按年龄、性别配对原则纳入31例健康者作为对照。前瞻性监测HIV/AIDS患者在HAART基线、3、6、12个月的口腔表征、口腔念珠菌状态以及全身免疫情况。分别采集四个时点详细病史并进行口腔专科检查,同时采集患者的非刺激性全唾、口腔含漱液、外周静脉血;记录5分钟唾液流量并检测其pH值;采集到的口腔含漱液样本,通过沙氏琼脂培养基培养48h,定量检测患者口腔念珠菌负荷;之后,采用革兰染色、芽管和厚壁孢子形成实验进行形态学观察,CHROMagar显色培养基培养、45℃生长实验、玉米吐温80琼脂培养基及API20C AUX酵母菌鉴定系统对分离株进行生物分型鉴定。参照按美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS)提出的标准(M27-A3),采用微量稀释法对所有分离株进行了体外药敏试验,所测试药物为两性霉素B、氟胞嘧啶、氟康唑和伊曲康唑。采用流式细胞技术检测患者外周血CD4+T淋巴细胞计数及CD4+/CD8+比值。所得数据采用SPSS16.0软件分析,HIV/AIDS患者HAART基线、3、6、12个月的口腔念珠菌负荷、唾液流速、pH值、外周血CD4+T淋巴细胞计数、CD4+/CD8+比值的变化比较采用Friedman M检验或重复测量方差分析。口腔念珠菌负荷、CD4+T淋巴细胞计数、CD4+/CD8+比值、唾液流量、pH值之间相关关系根据数据或转换后的类型采用Pearson相关分析或Spearman秩相关分析,或分组后采用两独立样本t检验或Wilcoxon秩检。四个时点口腔表征发生率、口腔念珠菌检出率、分离株对四种药物的耐药率及各种念珠菌对四种药物的耐药率用四格表的卡方检验。结果:在本研究中,HAART基线时67.78%HIV/AIDS患者(61/90)有口腔表征,包括口腔念珠菌病17例(假膜型14例、红斑型3例),口腔毛状白斑17例,复发性阿弗他溃疡12例,口干症7例,慢性牙周病6例,口腔白斑、疱疹性口炎各3例,灼口综合征、口角炎各2例,苔藓样反应、口腔扁平苔癣各1例;其中两种口腔表征并存者11例。在HAART期间,有新发的口腔念珠菌病、复发性阿弗他溃疡、单纯疱疹性口炎、口角炎等,但未见口腔毛状白斑新出现。大部分口腔念珠菌病在治疗初期消失;口腔毛状白斑亦有不同程度好转,但进度稍缓。HAART12个月后口腔表征发生率明显降低(χ2=10.890,P=0.001)。治疗基线时,有口腔表征CD4+T淋巴细胞计数低于无口腔表征(t=-2.102,P=0.038);患有口腔念珠菌病患者的CD4+T淋巴细胞计数、 CD4+/CD8+比值均低于无口腔念珠菌病患者(t=-2.603,P=0.011;t=-2.744,P=0.007)。HAART基线、3个月、6个月、12个月时HIV/AIDS患者口腔念珠菌负荷分别为57.6(482) CFU/ml、15.5(156) CFU/ml、17(93) CFU/ml、4(35) CFU/ml,口腔念珠菌负荷总体呈下降趋势(χ2=8.487,P<0.05);HIV/AIDS组治疗基线、3个月、6个月口腔念珠菌阳性检出率均高于对照组(P<0.05),治疗12个月时接近对照组;HIV/AIDS组HAART基线时的口腔念珠菌高负荷率高于健康对照组(P<0.05),治疗3、6、12个月与对照组差异均无统计学意义(P>0.05)。四个时点共分离出334株念珠菌,其中基线、3个月、6个月、12个月时分离出的念珠菌株数分别是94株、86株、91株、63株;通过对这些分离株的生物分型进行鉴定,发现以白色念珠菌为主(215/334),非白色念珠菌中以近平滑念珠菌(50/119)为主,其他非白色念珠菌包括光滑念珠菌、克柔念珠菌、热带念珠菌、季也蒙念珠菌和都柏林念珠菌以及一些罕见念珠菌等。基线与HAART12个月比较,分离出对两性霉素B,氟胞嘧啶耐药菌株的患者比例,差异无统计学意义(χ2=2.22,P=0.136;χ2=0.001,P=1.000);分离出对氟康唑、伊曲康唑耐药菌株的患者比例经比较,差异均有统计学意义(χ2=4.038,P=0.044;χ2=4.000,P=0.046);白色念珠菌对氟康唑和伊曲康唑的耐药率呈上升趋势(χ2=6.665,P=0.01;χ2=6.506,P=0.011)。CD4+T淋巴细胞计数、CD4+/CD8+比值、唾液流速和pH均呈上升趋势(P<0.05);口腔念珠菌负荷与CD4+T淋巴细胞计数(P<0.001,r=-0.306)、CD4+/CD8+比值(P<0.001,r=-0.243)均呈负相关,与唾液pH值(P<0.001,r=-0.288)亦呈负相关,与唾液流速(P=0.096,r=-0.088)无统计学相关。结论:HIV/AIDS患者在HAART第一年过程中常出现口腔表征,尤其以口腔念珠菌病和口腔毛状白斑较多见。口腔念珠菌病、复发性阿弗他溃疡、单纯疱疹性口炎、口角炎等在治疗过程中可反复出现;HAART有利于大多口腔病损初期消失或不同程度好转。在HAART第一年过程中,HIV/AIDS患者口腔念珠菌负荷、检出率、高负荷率均降低;检出的念珠菌仍以白色念珠菌为主,非白色念珠菌以近平滑念珠菌为主;对氟康唑和伊曲康唑敏感性降低,但对两性霉素B和氟胞嘧啶敏感性无明显变化。口腔表征的变化趋势可虑作为艾滋病进展和HAART疗效评估的参考指标。口腔念珠菌负荷与CD4+T淋巴细胞计数、CD4+/CD8+比值、pH值呈负相关,与唾液流速无统计学相关。低CD4+T淋巴细胞计数、CD4+/CD8+比值、唾液pH可能是口腔念珠菌病发生的风险因素。
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